目的：　　四跨膜蛋白超家族（transmembrane4 super family，TM4SF）是一类小分子糖蛋白，具有四个高度疏水的跨膜结构域，目前在人类中已发现33个不同的TM4SF成员。四跨膜蛋白家族成员之间或与细胞膜表面分子相互作用，形成跨膜蛋白网络，参与调控细胞增殖、分化、细胞粘附、侵袭转移和细胞信号转导。TSPAN31是四跨膜蛋白超家族重要成员之一。文献报道，TSPAN31可能与肿瘤发生、发展密切相关。然而，对 TSPAN31功能及分子机制的研究尚未见报道。本课题我们着重研究TSPAN31在细胞信号转导过程中扮演的角色，进一步探讨它们在肝癌发生发展中的表达调控机制及其意义。　　方法：　　通过天然反义转录本数据库（NATsDB）查询 TSPAN31与 CDK4基因；利用Real-time PCR技术检测天然反义转录本TSPAN31与靶基因CDK4在肝癌细胞中的表达；在肝癌细胞中，利用干扰或过表达TSPAN31的方法检测CDK4表达变化，利用补救实验探讨TSPAN31对CDK4发挥调节作用的机制；通过双荧光素酶报告基因检测细胞荧光素酶活性；利用侵袭实验和迁移实验检测 siRNA沉默 TSPAN31对肝癌细胞运动能力的影响；通过细胞免疫荧光实验分析下调 TSPAN31后细胞中β-catenin蛋白的分布情况；利用siRNA沉默TSPAN31或p53和药物干预的方法探讨TSPAN31在细胞信号转导过程中的作用。　　结果：　　天然反义转录本数据库（NATsDB）显示TSPAN31与CDK4属于一对顺式天然反义转录本。在肝癌细胞中，siRNA沉默TSPAN31上调CDK4 mRNA和蛋白水平，且TSPAN31主要通过3’UTR区调节CDK4表达。双荧光素酶报告基因检测显示miR-135b靶向调控TSPAN31。PI3K小分子抑制剂LY-294002抑制miR-135b表达，上调TSPAN31 mRNA表达水平。　　siRNA沉默 TSPAN31有效抑制肝癌细胞侵袭和迁移能力。TSPAN31调控MT1-MMP介导的MMP2活性。我们在观察siRNA沉默TSPAN31对PI3K/AKT信号通路上相关基因表达变化时发现，TSPAN31表达下调抑制 pAKT、pGSK3β和β-catenin蛋白表达。细胞免疫荧光实验显示 TSPAN31下调后细胞核内分布的β-catenin蛋白减少。在肝癌细胞中，siRNA沉默p53促进TSPAN31表达，MDM2小分子拮抗剂 Nutlin-3下调 TSPAN31 mRNA和蛋白水平，这提示 p53参与调控TSPAN31基因转录。　　结论：　　我们的研究提示天然反义转录本 TSPAN31主要通过3’UTR区调节 CDK4表达。miR-135b靶向调控TSPAN31。p53作为重要的转录因子，参与调控TSPAN31基因转录。TSPAN31可能通过形成跨膜蛋白网络，活化PI3K/AKT信号通路。进一步研究发现，TSPAN31可影响肝癌细胞侵袭和迁移。