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第一部分:东莨菪碱造记忆障碍模型小鼠试验部分(莲房原花青素对东莨菪碱所致记忆获得性障碍的作用研究)目的:观察莲房原花青素对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍的影响。方法:50只雄性昆明种小鼠随机分为5组,每组10只,即正常对照组、模型组、莲房原花青素低剂量组(L-LSPC,50 mg/kg)、莲房原花青素中剂量组(M-LSPC,100 mg/kg)、莲房原花青素高剂量组(H-LSPC,150 mg/kg)。三个剂量组分别按剂量给予莲房原花青素连续灌胃30天,其间正常组和模型组灌胃等量的生理盐水。每次测试前10 min给予东莨菪碱腹腔注射(1 mg/kg, i.p.)致小鼠记忆障碍模型,以行为学实验(Morris水迷宫、跳台法)为指标观察莲房原花青素对于小鼠学习记忆障碍的作用。并通过检测脑组织中乙酰胆碱酯酶AChE的活性观察各组小鼠脑内胆碱能系统的变化。结果:相对于模型对照组小鼠,莲房原花青素能够显著提高东莨菪碱所致记忆障碍小鼠在Morris水迷宫中的表现,明显缩短其潜伏期,并减少其游泳距离;在跳台实验中可以延长平台停留期,并显著减少错误次数。并且,莲房原花青素能够抑制东莨菪碱所致的AChE活性升高。结论:莲房原花青素对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍有明显的改善作用。其机制之一可能是基于其对胆碱能系统的影响。第二部分老年鼠试验部分(莲房原花青素对老年大鼠学习记忆减退障碍的影响及其可能机制的研究)第一节:莲房原花青素对老年记忆减退障碍大鼠学习记忆的影响目的:通过Morris水迷宫测试,观察莲房原花青素对老年学习记忆障碍大鼠空间学习和记忆能力的影响。方法:应用Morris水迷宫对老年大鼠进行筛选,以4月龄年轻大鼠的潜伏期为基准,从200只18月龄的老年SD (Sprague–Dawley)雌性大鼠中挑选出学习记忆障碍大鼠和老年记忆正常大鼠。将老年记忆障碍大鼠随机分为三组:即为老年记忆障碍组(AI)、莲房原花青素低剂量组(L-LSPC,50 mg/kg)及高剂量组(H-LSPC,100 mg/kg) ;同时以4月龄SD大鼠和老年记忆正常大鼠分别作为年轻对照组(young)和老年记忆正常对照组(AU)。L-LSPC及H-LSPC组分别按剂量给予莲房原花青素连续灌胃7周,其间老年正常组及青年组灌胃等量的生理盐水。通过Morris水迷宫观察原花青素对于老年记忆障碍大鼠空间学习及记忆能力的影响。结果:与AI组大鼠相比,L-LSPC和H-LSPC均能够显著提高老年记忆障碍大鼠的空间学习及记忆能力,表现为L-LSPC和H-LSPC组大鼠在Morris水迷宫中潜伏期显著缩短,游泳距离显著减少;其中H-LSPC组的潜伏期与游泳距离两个指标均与青年组及AU组无统计学差异。结论:莲房原花青素对老年大鼠的记忆减退障碍有明显的改善作用。第二节莲房原花青素对于老年记忆减退障碍大鼠脑组织中氧化抗氧化水平的影响目的:观察莲房原花青素对老年记忆障碍大鼠海马与小脑组织中氧化抗氧化水平的影响。方法:通过检测各组大鼠海马和小脑中总抗氧化能力(total antioxidant capacity, TAO-C),丙二醛(malondialdehyde,MDA),抗氧化剂谷胱甘肽(glutathione,GSH)的水平,抗氧化酶线粒体超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),过氧化氢酶(catalase,CAT),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)等的活性,以及蛋白羰基的含量,来观察莲房原花青素对老年记忆障碍大鼠脑组织中氧化抗氧化水平的改善作用。结果:1与青年组大鼠相比,老年鼠AU及AI组脑组织内氧化损伤的程度显著增高。AU组和AI组之间无统计学差异。2与老年鼠AU及AI组相比,L-LSPC和H-LSPC均能够显著减轻老年记忆障碍大鼠脑组织内氧化损伤的程度。表现为L-LSPC和H-LSPC组大鼠脑组织内MDA的水平降低,TAO-C的水平升高。且H-LSPC组的改变更为显著,呈现剂量依赖关系。3与老年鼠AU及AI组相比,L-LSPC和H-LSPC均能显著提高AI大鼠脑组织内抗氧化剂的水平和抗氧化酶的活性。且H-LSPC组的改变更为显著,呈现剂量依赖关系。结论:莲房原花青素可能通过降低脑组织内氧化应激损伤的程度,提高抗氧化剂及抗氧化酶的水平而发挥其对于老年鼠脑组织的保护作用。第三节莲房原花青素对老年记忆减退障碍大鼠脑组织中胆碱能系统的影响目的:观察莲房原花青素对于老年记忆障碍大鼠海马与小脑组织中胆碱能系统的影响。方法:通过检测各组大鼠海马与小脑中乙酰胆碱ACh的含量,乙酰胆碱酯酶AChE及乙酰胆碱转移酶ChAT的活性,观察莲房原花青素对于老年记忆减退障碍大鼠胆碱能系统的影响。结果:1与AU组和青年组相比,AI组大鼠海马和小脑组织内的ACh含量显著降低,L-LSPC及H-LSPC均能显著提高老年记忆障碍大鼠脑组织中ACh的含量,与AU组和青年组无统计学差异,且H-LSPC组的改变更为显著,呈现剂量依赖关系。2 ChAT的活性在各组间无显著性差异。3与青年组相比,AI组大鼠海马和小脑组织内AChE的活性明显降低,L-LSPC及H-LSPC均能显著提高老年记忆障碍大鼠脑组织中AChE的活性,且H-LSPC组的改变更为显著,呈现剂量依赖关系。结论:LSPC能够通过逆转AChE活性的降低,提高ACh的水平改善老年记忆障碍大鼠脑组织中胆碱能系统的功能,进而改善其学习记忆以及认知的能力。