哮喘豚鼠模型肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞和外周血嗜酸性粒细胞凋亡率及存活率的研究

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目的:探讨哮喘豚鼠肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞(eosihophils frombronchoalveolar lavage fluid,BALF-EOS)和外周血嗜酸性粒细胞(eosinophils from peripheral blood,PB-EOS)在体外不同时段的凋亡率及存活率,以及白细胞介素-5(interleukin-5,IL-5)在体外对哮喘豚鼠模型BALF-EOS及PB-EOS的影响。方法:将40只豚鼠随机分为哮喘组20只,正常对照组20只。用卵蛋白致敏复制哮喘豚鼠模型,抽取外周血及支气管肺泡灌洗液,用Percoll不连续密度梯度离心法分离哮喘组的BALF-EOS和PB-EOS,加入IL-5(10u/ml)干预,以吖啶橙(Arcidine orange,AO)/溴乙啶(Ethidium Bromide,EB)双荧光染色法动态观察0小时,24小时,48小时,72小时BALF-EOS和PB-EOS的凋亡率及存活率,以不加入IL-5的空白组作对照。结果:(1)哮喘组BALF-EOS与PB-EOS 0小时凋亡率、存活率无明显差异(均P>0.05)。(2)哮喘组BALF-EOS空白对照组24小时,48小时,72小时凋亡率均低于PB-EOS空白对照组(均P<0.05)。哮喘组BALF-EOS空白对照组24小时,48小时,72小时存活率均高于PB-EOS空白对照组(均P<0.05)。(3)哮喘组PB-EOS IL-5干预组,24小时,48小时,72小时凋亡率均低于PB-EOS空白对照组(均P<0.05)。而哮喘组PB-EOS IL-5干预组,24小时,48小时,72小时存活率均高于PB-EOS空白对照组(均P<0.05)。(4)哮喘组BALF-EOS IL-5干预组24小时,48小时,72小时凋亡率均低于BALF-EOS空白对照组,(均P<0.05)。哮喘组BALF-EOS IL-5干预组24小时,48小时,72小时存活率均高于BALF-EOS空白对照组(均P<0.05)。(5)哮喘组BALF-EOS IL-5干预组24小时,48小时,72小时凋亡率均低于PB-EOS IL-5干预组(均P<0.05)。哮喘组BALF-EOS IL-5干预组24小时,48小时,72小时存活率均高于PB-EOS IL-5干预组(均P<0.05)。结论:(1)哮喘豚鼠模型体外的BALF-EOS与PB-EOS在0小时的凋亡率、存活率无明显差异性。(2)哮喘豚鼠BALF-EOS在24小时,48小时,72小时凋亡率均低于PB-EOS,而各时段BALF-EOS的存活率高于PB-EOS。(3)IL-5能延长BALF-EOS及PB-EOS的生存时间,抑制BALF-EOS及PB-EOS凋亡,对前者的作用更强。
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