本文以中华蜜蜂Apis cerana cerana Fabricius和意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica Spinola的成年工蜂为研究对象,系统比较了这两种蜜蜂乙酰胆碱酯酶（AChE）的一些生物化学特性及对抑制剂的敏感度,并对其进行了初步纯化。研究结果如下: 1 用正交设计试验方法研究了AChE酶浓度、底物（ATCh）浓度、反应体系的pH、反应温度、反应时间5个因素对意大利蜜蜂头部AChE活性的影响。结果表明,除底物浓度对反应有显著影响外（P<0.05）,其他四个因素对反应都有极显著的影响（P<0.01）,在进行蜜蜂AChE活性测定时需要加以控制。在进行了极差分析、方差分析及多重比较后得到了蜜蜂头部AChE活性测定的最适条件。酶的终浓度为0.2头/mL;底物终浓度为0.8mmol/L;pH为7.5;温度为40℃:时间为5min。 2 研究了中华蜜蜂和意大利蜜蜂AChE活性的体躯分布及头部AChE的亚细胞分布。两种蜜蜂AChE的活性主要分布于头部,分别为65%和65.7%。在头部和腹部两种蜜蜂的分布没有显著差异（P>0.05）,但中华蜜蜂胸部AChE的活性分布比例极显著高于意大利蜜蜂（P<0.01）。两种蜜蜂头部AChE的亚细胞分布趋势一致,中华蜜蜂和意大利蜜蜂头部AChE的活性主要存在于10,000g离心的沉淀（线粒体部分）中,中华蜜峰线粒体部分AChE的活性占其总活性的60%,意大利蜜蜂占其总活性的70%。这两种蜜蜂头部的AChE主要以膜结合的形式存在,超过90%的活性位于有膜的亚细胞结构中（线粒体、微粒体、细胞核及细胞碎片）。 3 比较了两种蜜蜂头部AChE对底物的特异性。根据K_m值,中华蜜蜂头部AChE对四种底物亲和性大小的顺序依次为PrTCh>BuTCh>ATCh>MeTCh;意大利蜜蜂为BuTCh>PrTCh>ATCh>MeTCh。V_max显示,中华蜜蜂头部AChE对四种底物水解效率的高低顺序为MeTCh>ATCh>PrTCh>BuTCh,意大利蜜蜂为ATCh>MeTCh>PrTCh>BuTCh。两种蜜蜂对四种底物亲和性的差异不