【摘 要】
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近几十年来,由于陆地微生物资源被大量的开发利用。海洋又因其高压、高盐、寡营养等环境条件,从而使得从海洋生物中提取到的活性物质具有更强更多的生物活性。从海洋生物中分
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近几十年来,由于陆地微生物资源被大量的开发利用。海洋又因其高压、高盐、寡营养等环境条件,从而使得从海洋生物中提取到的活性物质具有更强更多的生物活性。从海洋生物中分离出不同的化合物就意味着产生着一种有希望的天然产物。本文通过活性筛选(包括除草、杀虫、抗菌、抗肿瘤),发现海绵内生菌NH1403菌株的发酵液对稗草和马齿苋具有较好的除草活性。对人的肝癌细胞(HepG2)具有较好的抗肿瘤活性。在该实验中通过对抗肿瘤活性进行追踪,分离出该菌株产生抗肿瘤活性的代谢产物。通过萃取、薄层层析、高效液相色谱分析等技术方法进行分析和制备,最终得知三个活性物质即A1、B1和B2均具有抗肿瘤细胞的活性。因为发酵液具有较好的除草活性,因此进一步验证了这三个化合物是否具有除草活性测试。结果发现,化合物A1和B2对稗草和马齿苋种子的发芽具有抑制活性。由于化合物B1和B2的量较少,不足以进行结构解析,因此只对化合物A1进行了结构解析。通过高分辨质谱分析,得到A1化合物的相对分子质量为402。再将该纯品进行1H-NMR、13C-NMR、DEPT90、DEPT135、1H-1HCOSY、HMBC、HSQC 核磁共振分析,得到其分子式为C24H38O5,并解出其结构。通过HPLC建立了可用于检测化合物A1在发酵和分离纯化过程中含量的定量分析方法。通过对NH1403菌株的形态特征的观察、生理生化实验的现象和16SrDNA基因序列的测试及进一步的建立生长发育树,确定了该NH1403菌株属于芽孢杆菌属。
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