本论文通过系统筛选，从植物枸骨（Llex cornuta Lindl.）中分离到的一株具有高抗菌活性的内生真菌，并以此作为研究对象，对该内生真菌进行了种属鉴定，并对其代谢产物中主要活性成分进行了提取、分离和结构解析；在此基础上研究了主要活性成分的分析检测方法和抑菌作用，通过紫外诱变选育出高效活性生产菌株，运用随机扩展多态性DNA（RAPD）技术对该菌及其诱变体进行DNA多态性分析，最后对活性成分的安全性和药效进行了评价。主要研究结果如下：　　（1）枸骨内生真菌的属种鉴定：根据形态培养特征和生理生化特征，对照《真菌鉴定手册》将该内生真菌初步归属为木霉属真菌哈茨木霉（Trichoderma harzianum Rifai），将其命名为哈茨木霉菌株L。　　（2）哈茨木霉菌株L的代谢产物的主要抗菌活性成分：分离纯化得到哈茨木霉菌株L代谢产物的主要抗菌活性成分，经IR、MS和NMR光谱分析确定为一倍半萜类化合物，英文名称为：trichodermin，化学名称：4β-乙酰基-12，13-环氧-9-单端孢霉烯。并且建立了该物质的气相色谱分析方法。　　（3）活性物质trichodermin的抑菌活性：室内毒力测定结果表明，Trichodermin对9种植物病原真菌的菌丝生长和2种植物病原真菌孢子的萌发均有不同程度的抑制作用。其中对水稻纹枯病菌[Thanatephorus cucumeris（Frank）Donk]和黄瓜立枯病菌（Rhizoctonia solani Küehn）有较好的毒力，其 EC50值分别为0.7071μg/mL和0.3253μg/mL；对番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea Pers）和番茄早疫病[Alternaria solani（Ellis et Martin） Jones et Grout.]，毒力作用次之，其EC50值分别为3.7287μg/mL和10.6772μg/mL；对黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum Owen）、西瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporium f.sp.niveum）、菜豆炭疽病菌[Colletotrichum lindemuthianum（sacc. et Magn.）Br. et Cav.]和葡萄炭疽病菌[Colletotrichum gloeosporioides（Penz.）Sacc.]的毒力相对较弱，其EC50值分别为23.4072、41.6013、33.0261和28.6393μg/mL；对水稻胡麻斑病菌[Cochliobolus miyabeanus（Ito&Kuribayashi）]的毒力最差（>800μg/mL）。对黄瓜枯萎病菌（F. oxysporum f.sp.cucumerinum）和西瓜枯萎病菌（F.oxysporium f.sp.niveum）孢子萌发的抑制作用EC50分别为2.2209和2.2905μg/mL。活体试验结果表明，Trichodermin浓度为100mg/L时，对番茄早疫病（A.solani）及黄瓜立枯病（R..solani）的保护效果达97.8％和98.1%，治疗效果达96.7%和97.3%。　　（4）Trichodermin制剂的药效、安全性及毒理学研究：盆栽试验结果表明，Trichodermin1000倍液对黄瓜立枯病（R..solani）有良好的治疗和保护作用，7天后保护防效和治疗防效分别为88.89%和95.83%； Trichodermin在番茄及土壤中降解较快，残留极低，施药后的第10天trichodermin在番茄中的残留量仅0.0054mg/kg，在土壤中的残留量仅为0.0013mg/kg；经毒理学研究发现，Trichodermin原药产品对哺乳类动物十分安全，按 GB15670-1995《农药登记毒理学试验方法》的分级标准该农药的原药属低毒。　　（5）高效菌株的选育及诱变前后菌株RAPD分析：以哈茨木霉菌株L作为出发菌株，进行紫外线二次复合诱变处理，通过初筛和复筛，获得一株高产突变株 UV-5-3，其产素水平为164.75μg/mL，是原始菌株2.3倍。传代试验表明，该突变株的高产性能遗传特性较稳定。运用RAPD技术对哈茨木霉菌株L及相应诱变体进行DNA多态性分析，12条随机引物共扩增出106条谱带，多态性标记数为58条，占扩增总带数的54.7%。DNA片段大小范围在300~5000bp内，大多数集中在600~2000bp。利用NTSYS统计软件对扩增结果进行统计和聚类，结果表明，哈茨木霉菌株 L诱变前后具有一定的遗传稳定性和遗传多态性，但供试菌株的RAPD分析与其生防效果之间不存在相关性，生防效果好的哈茨木霉菌株没有特异性标记的RAPD带。