论文部分内容阅读
目的:1.研究靶蛋白SKP2和HINT1蛋白在肝细胞癌组织中的表达及与肝细胞肝癌各项临床病理指标的关系。2Westernblot检测比较细胞转导HINT1前后HINT1与SKP2的表达情况,进而分析HINT1基因转导对人肝癌细胞系QGY-7701生长增殖的影响和HINT1与SKP2的关系。方法:1.用免疫组化SP法检测SKP2和HINT1蛋白在40例肝细胞肝癌、12例正常肝组织中的表达。2.观测QGY-7701转导HINT1基因后对其生长增殖和SKP2的表达的影响:(1)细胞培养;光学显微镜观察细胞形态。(3)阳离子脂质体转染技术将HINT1导入人肝癌细胞系QGY7701。分为对照组:QGY-7701,脂质体组:QGY-7701+脂质体,空载体组:QGY7701+脂质体+pcDNA3.1, HINT1组:QGY-7701+脂质体+pcDNA3.1/HINT1;(4)MTT法检测细胞增殖及绘制生长曲线。(5)Western-Blot检测转导HINTl前后QGY7701中HINT1及SKP2蛋白的表达。结果:40例肝癌组织中SKP2的阳性表达率为(37.5%)显著高于癌旁组织(5%)和正常肝组织(阴性表达)。阳性表达与组织分化程度(p<0.05)、转移(p<0.05)密切相关。而与年龄、性别、HBsAg以及AFP水平等均无明显相关(p>0.05)。肝细胞癌中SKP2的表达与HINT1表达呈中度负相关(r=-0.559,p<0.05)。HINT1转导可抑制人肝癌细胞株QGY-7701的增殖。肝癌细胞系HINT1转染前后HINT1及SKP2表达有变化。结论SKP2在肝细胞癌中高表达,随分化程度的降低而升高。提示SKP2可能与肝癌的发生发展有关。HINT1可能与肝细胞肝癌的发生发展有关。HINT1基因可以降低人肝癌细胞的增殖能力,抑制其细胞生长。HINT1基因在体外可降低人肝癌细胞株内SKP2的表达。联合检测SKP2与HINT1指数的临床价值,为肝癌患者的诊断、预后评价、综合治疗方案设计提供有力的理论依据。