论文部分内容阅读
三阴性乳腺癌（Triple-negative breast cancer,TNBC）特指雌激素受体（Estrogen receptor,ER）、孕激素受体（Progesterone receptor,PR）以及人表皮生长因子受体2（Human epidermal growth factor receptor 2,HER-2）均为阴性的一类乳腺癌亚型,由于缺少内分泌治疗和抗HER-2治疗的有效靶点,该类乳腺癌一直是乳腺癌治疗领域的一大难题。尽管有研究表明三阴性乳腺癌通常大量表达表皮生长因子受体EGFR,但是临床上应用EGFR抑制剂类药物治疗三阴性乳腺癌并没有取得理想的效果,大部分患者对EGFR抑制剂类药物具有内在的耐药性或者在后期治疗过程中获得耐药性。本研究的目的是初步探讨乳腺癌细胞对EGFR抑制剂类药物产生耐药性的机制。本实验所用细胞为三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231和HER-2阳性乳腺癌细胞MCF-7。我们初步的实验结果表明,虽然在MDA-MB-231细胞中EGFR的表达水平比较高,但是其对EGFR酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼并不敏感(IC50=24.99±0.06μmol/L)。MDA-MB-231细胞高表达Annexin A2,并且大量研究已经证明Annexin A2的表达水平与肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移等有关。为证明Annexin A2也会参与乳腺癌细胞对吉非替尼抗药性的产生,我们降低了MDA-MB-231细胞中Annexin A2的表达水平,并在低表达Annexin A2的MCF-7细胞中过表达了Annexin A2。结果表明,乳腺癌细胞对吉非替尼的敏感性与Annexin A2的表达水平有关,降低MDA-MB-231细胞中Annexin A2的表达量之后,其对吉非替尼的敏感性增强,而上调MCF-7细胞中的Annexin A2后,其对吉非替尼的敏感性降低。为进一步探究Annexin A2参与吉非替尼耐药性产生的机制,我们在低表达Annexin A2的MCF-7细胞中过表达了第23位酪氨酸处于非磷酸化状态的Annexin A2（Anxa2-Y23A）以及第23位酪氨酸处于磷酸化状态的Annexin A2（Anxa2-Y23E）,结果说明第23位酪氨酸磷酸化显著降低了乳腺癌细胞对吉非替尼的敏感性。综上,这些结果说明Annexin A2及其第23位酪氨酸磷酸化是引起乳腺癌细胞对吉非替尼耐药的重要原因之一。