肝移植(liver transplantation，LTx)已成为治疗各种终末期肝病的有效方法。供肝短缺问题制约着肝移植的发展。无心跳供肝由于遭受热缺血损伤、冷保存损伤和再灌注损伤，在这一病理生理过程中Kupffer细胞被激活释放TNF-α等细胞因子引起微循环障碍，及肝细胞和内皮细胞受损是肝移植后原发性移植物无功能(primary nonfunction，PNF)的主要原因。通过一些措施减轻供肝缺血再灌注损伤，有效地利用无心跳供肝是肝移植领域的研究热点。目前认为，一氧化氮(nitric oxide)在缺血再灌注损伤中起着重要作用，内源性NO可调节肝脏血流量、抑制血小板聚集和抑制内皮素(endothelin，ET)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha，TNF-α)的释放。左旋精氨酸(L-Arginine，L-Arg)是NO的前体，补充外源性L-Arg可以提高NO的含量。 目的：本研究采用无心跳供肝大鼠原位肝移植模型，观察郑州大学2002年硕士毕业论文 左旋精氨酸对大鼠无心跳供肝缺血再灌注损伤防护的实验研究左旋精氨酸对心跳停搏后不同时间的供肝缺血再灌注损伤的影响，并探讨其机理，为临床合理有效地利用无心跳供肝提供理论基础。 方法：Wstar大鼠 104只，随机取 8只为正常对照组（N组人另96只随机分为供体组和受体组，两两随机配对后再随机分为6组，即实验对照 1组K1组），实验对照 2组K。组），实验对照3组＊。组）和实验1组庄；组），实验2组m。组），实验3组侄3组人每组16只。CI、EI组为活体供肝后行移植术；CyE。组为心跳停搏后30分钟供肝并行移植术；Cy民组为心跳停搏后45分钟供肝并行移植术。动物模型建立参照Kamada及Came H套管法原位肝移植的方法。其中各实验组分别在保存液中加入 lmmol／L左旋精氨酸，受体在再灌注前 10分钟技10mg／kg从尾静脉注射左旋精氨酸进行预处理；各对照组则用生理盐水做相应处理。用4℃Euro七 液10ml灌注供肝至变白，切除供肝置于4℃Euro七 液中保存，ill后行原位肝移植。在受体移植肝 l］静脉复流后山，3h，24h抽取血样，并于门静脉复流后3h切取肝脏组织。N组不行肝移植，开腹后直接抽取下腔静脉血及切取肝脏组织。血标本离心后取血清或血浆－70C保存，肝组织按电镜样本处理，待测。 用酶还原法检测血清NO。”／NO。水平，用放射免疫法检测血浆ET水平和血清TN’FJ水平，用自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶hlanine aminotransferase，ALT人 天冬氨酸基 2 郑州大学2002年硕士毕业论文 左旋精氨酸对大鼠无心跳供肝缺血再灌注损伤防护的实验研究 转移酶hspartate aminotransferase，AST）水平，肝脏组织行电 镜检查。移植过程中记录供肝热、冷缺血时间，受体无肝期和 受体手术时间。应用SPSS10刀统计分析系统，采用重复测量设 计的方差分析，t检验和单因素方差分析对全部数据进行统计处 理，取Q功刀5为显著性检验水准。 结 果：＊）六组动物之间供肝冷缺血时间、受体无肝期、 受体手术时间比较差异无显著性o＞0刀5人Q）与正常对照组 相比，各实验组及实验对照组大鼠门静脉复流后lh血清ALT 水平明显升高o功刀5人 与实验对照组相比，各实验组大鼠门 静脉复流后lh，3h，24h血清ALT水平明显降低o叼．05人各 实验对照组之间相比，q组、q组大鼠血清ALT水平明显高于 C；组，C。组又明显．高于C。组（、P刃．05人门）与正常对照组相 比，各实验组及实验对照组大鼠门静脉复流后lh血清AST水平 明显升高o刃刀引；与实验对照组相比，各实验组大鼠门静脉 复流后lh，3h，2411血清AST水平明显降低p1刀5人各实验 对照组之间相比，＊组、Q组大鼠血清＊ST水平明显高于C； 组，C组又明显高于C组吓《刀5人 K）与正常对照组相比， 各实验组及实验对照组大鼠门静脉复流后lh血清TN－FJ水平 明显升高J＜0刀引；与实验对照组相比，各实验组大鼠门静脉 复流后lh，3h血清TNF－口水平明显降低（P＜0＊5）；24h实验 组与相应的实验对照组无显著性差异o叩刀5人q组、Q组大 鼠血清 Th－Q水平明显高于 C；组，C；组又明显高于 C。组 3郑州大学2002年硕士毕业论文 左旋精氨酸对大鼠无心跳供肝缺血再灌注损伤防护的实验研究 o叼刀5人 u）与正常对照组相比，各实验组及实验对照组大鼠门静脉复流后lh血清NO。MO。”水平明显低于正常对照组 0叩刀5人与实验对照组相比，各实验组大鼠门静脉复流后lh，3h，2仙血清＊0。－／N 0。”水平明显升高o＜0刀5人各实验对照组之间相比，民组C。组大鼠血清NOZ”／NO。”水平明显低于C1组，q组又明显低于C；组o叼刀5卜“）与正常对照组相比，各实