宫颈癌患者血浆miRNA-214的表达水平及对宫颈癌细胞功能的影响

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目的:探讨血浆mi RNA-214的表达水平在宫颈癌患者中的差异性,并分析其对宫颈癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。材料与方法:收集2016年1月至2018年1月中科院合肥肿瘤医院就诊经宫颈活检病理确诊为宫颈浸润癌的患者50例,作为实验组,平均年龄为(56.2±14.3)岁,并且均无合并其他妇科疾病及慢性疾病。排除标准:非初诊患者,即虽诊断为宫颈癌,但是已经接受过手术治疗、放疗、化疗等治疗的患者;有严重脏器疾病和其他系统肿瘤病史,如伴有心、肝、肺、脑、肾等器官及血液系统疾病。另选取中科院合肥肿瘤医院体检结果提示血压、各项化验检查、妇检、超声无异及宫颈癌初筛为阴性的健康女性人员50例,平均年龄为(50±7.9)岁,并且排除其他慢性疾病或恶性肿瘤的体检者为正常对照组。患者于术前三天、健康志愿者于就诊当天用含有乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝剂的血管采集静脉血标本2ml,轻摇匀后暂存4℃,1500转/分,离心15min,留取上清液,保存-80℃备用。采用实时荧光定量PCR法对两组血浆中的mi RNA-214进行检测分析,比较其表达差异。采用脂质体介导的转染方法将mi RNA-214模拟物转染,CCK-8法和流式细胞术检测宫颈癌细胞的增殖、细胞周期和凋亡。结果:1、实时荧光定量PCR法检测后mi RNA-214在宫颈癌、对照组标本中相对表达量不同,宫颈癌患者血浆中mi RNA-214水平(1.01±0.041 pg/ml)明显低于正常对照组(2.96±0.67 pg/ml),两者间差异有统计学意义;2、研究分析宫颈癌患者血浆中mi RNA-214含量与宫颈癌患者肿瘤病理资料(主要包括淋巴结转移、肿瘤大小、脉管浸润、FIGO分期以及肿瘤分化程度)间的关系后发现:当宫颈癌患者术后病理提示淋巴结转移及脉管浸润存在时,该类患者血浆中mi RNA-214表达水平明显降低,差异有统计学意义(P=0.0231,0.0295;<0.05)。而其它病理资料(包括肿瘤大小、FIGO分期以及肿瘤分化程度)患者血浆中mi RNA-214表达水平无显著差异(P>0.05);3、用CCK-8法检测mi RNA-214的表达对Si Ha细胞增殖情况的影响,发现mi RNA-214模拟物转染组的,即其对细胞生长速度有抑制作用,两组细胞生长速度的差异具有统计学意义;4、与mi RNA-NC对照组相比,mi RNA-214组宫颈癌细胞在S期细胞比例明显降低,凋亡细胞比例明显升高(P<0.05),而在G2/M期的细胞明显减少(P<0.05)。结果表明宫颈癌细胞mi RNA-214表达水平的下降可能会抑制G2/M期阻滞,而反之过表达mi RNA-214则能够显著促进宫颈癌细胞的凋亡。结论:1、在宫颈癌组织中mi RNA-214表达水平下调,作为宫颈癌早期诊断分子标志物有一定准确性;2、mi RNA-214可以抑制宫颈癌Si Ha细胞进入S期,并且促进Si Ha细胞凋亡,mi RNA-214可能是通过抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移、侵袭等特性,而发挥着抑癌作用。
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