细菌延伸因子Tu (elongation factor Tu, EF-Tu)是一种高丰度蛋白,在蛋白质生物合成的延伸过程中起到了关键性的作用。近年来,EF-Tu却是作为一种新发现的病原相关分子模式(Pathogen-associated molecular patterns, PAMPs)分子而受到高度重视。作为一个具有高度保守性的菌细胞内的蛋白质,它是如何从细胞内跨膜运动到细胞外,并且被宿主细胞特异性地识别进而引发宿主的免疫反应的。同时,在此过程中又有哪些膜蛋白起了重要的作用。这无疑具有着相当重要的生物学意义。试验首先采用Ni-NTA柱纯化和生物质谱技术,以模式大肠杆菌为试验材料,发现了内膜蛋白MdtE、外膜蛋白OmpF和具有4个跨膜片段的外膜蛋白OmpA与浆蛋白EF-Tu之间存在着蛋白质相互作用,形成了1个多蛋白复合体,被命名为EF-Tu多蛋白复合体。同时采用Western blotting、Far-Western blotting和免疫共沉淀等技术,充分证实了上述结论。并提出了该多蛋白质复合体的分子结构模型。在此基础上,研究这4种蛋白在胞浆中的结合情况。结果发现,他们以EF-Tu·OmpA,OmpF·OmpA和MdtE·OmpA 3种两两结合的形式存在。进一步探讨该复合体在细胞分泌性蛋白中的状态,发现该多蛋白质复合体缺少了MdtE,而以EF-Tu、OmpA和OmpF蛋白复合体形式分泌至胞外。最后,对EF-Tu多蛋白复合体与人单核/巨噬细胞结合情况进行了研究,发现EF-Tu、OmpA和OmpF仍然以一个多蛋白复合体的形式和细胞发生了相互作用,其中EF-Tu和OmpA为直接结合分子。这些结果提示OmpA和OmpF在EF-Tu被宿主细胞识别和引起免疫反应的过程中发挥了重要作用。上述研究首次发现了EF-Tu多蛋白复合体,揭示了该复合体从胞浆至胞外的形成和运输特征,阐明了其与动物细胞作用形式。这些研究结果对深入了解EF-Tu病原相关分子模式的生物学功能具有重要作用。