山东省出口水产品药物残留分析及代谢动力学研究

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我国是世界上最大的水产品贸易国,其中养殖水产品占重要比重。在水产养殖快速发展的同时,为了控制各种疾病,渔用药物在水产养殖中应用日益广泛,很多药物对人体有很大危害虽已明令禁止使用,但仍有大量药物残留屡被检出;另外,允许使用的药物残留量超标现象也十分突出。因此,水产品中渔用药物残留问题已成为制约我国水产品进入国际市场的关键问题。对水产品中药品残留检测技术和代谢动力学的系统研究有助于控制养殖过程中渔用药物的使用和减少药物残留,具有十分重要的现实意义。本研究以加工水产品为研究对象,研究了硝基呋喃代谢物残留检测的干扰因素,并建立了应用高效液相色谱(HPLC)同时检测饲料中四种硝基呋喃类原药的方法;以山东省出口的主要养殖水产品-石鲽鱼为研究对象,建立了适用于检测石鲽鱼各组织中磺胺类药物、喹诺酮类药物和四环素类药物残留量的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,并对磺胺二甲嘧啶、磺胺甲嗯唑、恩诺沙星、二氟沙星和土霉素5种药物的代谢进行研究,确定了其休药期,并提出了综合防控建议。结果如下:1.禁用药物硝基呋喃原药及其代谢物残留研究通过实验建立了利用乙腈提取残留药物,经正己烷和酸性氧化铝净化,HPLC检测饲料中四种硝基呋喃原药的检测方法。呋喃西林、呋喃妥因、呋喃它酮三种残留药物的检出限为0.15mg/kg,定量限为0.5mg/kg,呋喃唑酮检出限为0.075mg/kg,定量限为0.25mg/kg,四种药物的平均添加回收率均>75%,相对标准偏差均<10%。另外,对中日硝基呋喃代谢物残留检测方法进行比较,研究水产品加工环节中干扰呋喃西林代谢物(SEM)检测结果的因素。加工环节中使用的次氯酸钠和面粉中含有的偶氮甲酰胺是SEM的主要干扰因素,而检测技术差别和加工过程中使用乙醇对SEM的检测结果无影响。2.鱼体各组织中27种磺胺类和喹诺酮类药物残留同时检测方法的建立建立了用含1%甲酸的正己烷饱和乙腈溶液提取残留药物,正己烷多次净化,UPLC-MS/MS多反应监测正离子模式下同时检测鱼体各组织中27种磺胺类和喹诺酮药物残留的检测方法。该方法的线性检测范围为10.0~100.0μg/kg,相关系数均大于0.9970。27种药物在石鲽鱼肌肉、血液和肝脏组织的平均回收率为75.1%~110.3%,相对标准偏差均<12%,定量限为6.0~10.7μg/kg。3.鱼体各组织中4种四环素类药物残留检测方法的建立建立了用酸性缓冲溶液提取,Oasis HLB固相萃取柱净化,UPLC-MS/MS多反应监测正离子模式下测定鱼体各组织中4种四环素类药物残留的检测方法。该方法的线性范围为5.0~200.0μg/kg,相关系数为0.9982-0.9996。4种药物在石鲽鱼肌肉、血液和肝脏组织的平均回收率均>76.0%,相对标准偏差均<11%,定量限为4.3~8.3μg/kg/。4.限用药物代谢动力学研究在水温15±2℃下以口灌模式和混饲模式两种投药方式,研究了石鲽鱼中磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑,恩诺沙星、二氟沙星和土霉素的代谢及消除规律。结果发现,口灌模式下在石鲽鱼中磺胺二甲嘧啶、恩诺沙星、二氟沙星和土霉素的消除速度均为血浆>肌肉>肝脏,磺胺甲噁唑的消除速度为肌肉>肝脏>血浆;混饲模式下在石鲽鱼中磺胺二甲嘧啶、恩诺沙星和二氟沙星的消除速度都为血浆>肌肉>肝脏,磺胺甲噁唑和土霉素的消除速度均为肌肉>血浆>肝脏。根据5种药物药代动力学的研究,制定了混饲模式下对于石鲽鱼的休药期。当磺胺二甲嘧啶、磺胺甲嗯唑、恩诺沙星、二氟沙星和土霉素的给药剂量分别为100mg/kg、100mg/kg、20mg/kg、20mg/kg和50mg/kg鱼体重时,它们的休药期分别为28天、28天、26天、28天和26天。
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