新种微生物Actinoalloteichus nanshanensi的代谢产物研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:caoyufeiyu
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为了发现新的活性化合物,对本实验分离得到的一株具有较强抗菌活性的新种微生物Actinoalloteichus nanshanensis sp. nov. NEAU119的代谢产物进行分离纯化,结构鉴定和活性测定。本实验运用对人体肺癌细胞株A549的体外抗肿瘤及对表皮葡萄球菌和白色念珠菌的抗菌筛选模型,结合TLC检测,首先对NEAU119菌株的最佳发酵培养基进行筛选,最终选定XG培养基(葡萄糖2.0%,Malt Extract1.0%,玉米可溶性淀粉1.0%,Yeast Extract0.4%,CaCO30.2%,pH7.2-7.4)为最佳培养基。之后利用发酵罐(50L)进行放大发酵,利用硅胶、凝胶、HPLC等分离方法对菌株的发酵产物进行分离,最终得到12个化合物,利用核磁共振和质谱等分析方法进行结构鉴定,确定3个为含有5,5,6-三环骨架和四胺酸结构单元的大环内酰胺类化合物,其中化合物2为新化合物,1和3为已知化合物;另外9个化合物(4-12)为结构较新颖的环戊酮类新化合物,最后,对其中11个化合物进行抗肿瘤和抗菌活性评价,化合物1,2,3,8对人体肺癌细胞株A549的IC50分别为:1.71,2.37,1.36和14.67pg mL-1。化合物8和12对人体白血癌细胞株K562的IC50分别为11.87,92.03μgmL-1,对肾癌细胞株ACHN的IC50分别为23.36,97.60μgmL-1。另外化合物1,2,3表现出较好的抗菌活性。10个新化合物分别命名为:4-dehydroxy dihydromaltophilin (2);4-(3-hydroxypropyl)-6,7-dihydro-2H-cyclopenta[c]pyridine-1,5-dione (4);2-(hydroxymethyl)-6-(3-hydroxypropyl)-2-me-thoxy-3,3a-dihydro-2H-cyclopenta[b]furan-4(6aH)-one (5);(Z)-2-(1,5-dihydroxypent-2-en-2-yl)-3-(hydroxymethyl)cyclopent-2-enone (6);(E)-2-(1,5-dihydroxypent-2-en-2-yl)-3-(hydr-oxylmethy-1)cyclopent-2-enone (7);2H-2-(2-hydroxyethyl)-4-(3-hydroxypropyl)-6,7-dihydro-cyclopenta[c] pyridine-1,5-dione (8);4R*,7R*,11R*,2H-3,4,4a,5a,7,8-hexhydro-4-hydroxy-pyra-no[2,3-b]cycl-openta[d]pyran-9(6H)-one(9);4R*,7S*,11S*,2H-3,4,4a,5a,7,8-hexhydro-4-hydroxy-pyrano[2,3-b] cyclopenta[d]pyran-9(6H)-one (10);7R*,11R*,2H-3,4,4a,5a,7,8-hexhydro-pyrano[2,3-b]cyclopen-ta[d]pyran-9(6H)-one (11);2H-3,5a,7,8-hexhydro-pyrano[2,3-b]cyclopenta[d]pyran-9(6H)-one (12).
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