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芹菜是一种两年生的伞形科草本植物,在我国有着悠久的栽培历史,且种植面积广泛。芹菜中黄酮类化合物具有多种生物活性,主要包括抗氧化、抗炎、镇痛、降血脂、降血压等。其中芹菜叶是芹菜黄酮类化合物含量最多的一个部位。然而,针对芹菜叶中主要黄酮苷及其苷元的分离纯化、结构鉴定研究报道较少,无法全面阐述芹菜叶中黄酮类化合物具体化学结构。因此,以芹菜叶为原料,优化了芹菜叶黄酮苷最佳提取工艺;将一部分芹菜叶黄酮苷以酸水解法水解,获得其水解产物,然后对芹菜叶黄酮苷及其水解产物分别进行制备型高效液相色谱进一步分离纯化,研究了芹菜叶黄酮苷及其水解产物制备型高效液相色谱分离的最佳分离条件;最后将这两组分制备分离出的单体化合物进行结构鉴定,确定了芹菜叶黄酮类化合物单体结构,获得如下结果:(1)通过研究聚酰胺树脂静态吸附与解吸特性和动态吸附与解吸特性,获得聚酰胺树脂分离纯化芹菜叶粗提取最佳工艺条件:上样液黄酮浓度为0.3125 mg/mL,最大上样液体积8倍柱体积(BV),上样pH值为5.0,上样流速及洗脱流速为2 BV/h,水洗体积为4 BV,洗脱液乙醇体积分数为40%,洗脱液体积为6 BV,在此工艺条件下,芹菜叶黄酮苷含量由纯化前的6.15%提高到78.5%,总黄酮回收率为82.3%。(2)将部分芹菜叶黄酮苷水解获得其水解产物,再将芹菜叶黄酮苷及其水解产物这两部分通过分析型高效液相色谱初步优化到制备型高效液相色谱条件调整,确定芹菜叶黄酮苷及其水解产物最佳分离条件。其中制备型高效液相色谱分离芹菜叶黄酮苷最佳色谱条件为:以SinoChromODS-BP(10μm,30mm×250mm)为色谱柱,柱温控制为25℃,流动相A为100%甲醇,流动相B为0.1%甲酸,50:50比例等度洗脱,紫外检测波长267和333 nm,上样体积为100 mL,洗脱流速为20 min/min,可一次获取7种较纯单体化合物;制备型高效液相色谱分离芹菜叶黄酮苷水解产物最佳色谱条件为:以SinoChrom ODS-BP(10μm,30mm×250 mm)为色谱柱,柱温为25℃,流动相A为100%甲醇,流动相B为0.1%甲酸,60:40比例等度洗脱,紫外检测波长267和333 nm,上样量为100 mL,洗脱流速为20 min/min,可一次获取5种较纯单体化合物。(3)经过紫外光谱(UV),高效液相色谱(HPLC),超高分辨飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)和核磁共振技术(NMR)对制备分离出的组分进行物质结构鉴定,总共鉴定出11种化合物,其中包括1种酚酸类化合物和10种黄酮类化合物。其分别为绿原酸、木犀草素-7-O-葡萄糖-2-O-芹糖苷、木犀草苷、芹菜苷、3’-甲氧基芹菜苷、6-丙二酰基-木犀草素-7-O-葡萄糖-2-O-芹糖苷、6’-丙二酰基芹菜苷、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素、芹菜素和柯伊利素,所获得单体化合物纯度均高于97%。