本文通过饱和硫酸铵分步盐析结合Sepharose-4B凝胶柱以及DEAE—52阴离子交换柱层析分别提取纯化非免疫和温和气单胞菌免疫的斑点叉尾鮰血清免疫球蛋白(Ig)，采用单克隆抗体(MAF-13株)结合酶联免疫吸附(ELISA)检测提取物中血清免疫球蛋白的活性。结果表明非免疫斑点叉尾鮰的血消Ig主要存在于35％～45％的硫酸铵沉淀区间，而免疫斑点叉尾鮰的血清Ig则分布在35％～55％的硫酸铵沉淀区间内。在Sepharose-4B凝胶柱和DEAE—52阴离子交换柱层析纯化中Ig均出现在第一个蛋白峰。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行纯度鉴定，结果发现经过系列提纯的Ig样品杂蛋白条带逐渐减少，DEAE—52纯化后的Ig仅在重、轻链位置出现明显条带，表明纯化后的血清免疫球蛋白纯度较高。纯化的血清Ig用以制备兔抗斑点叉尾鮰血清Ig的多克隆抗体．采用ELISA方法分别测定单克隆抗体和多克隆抗体的特异性，结果表明抗斑点叉尾鮰血清Ig的多克隆抗体和单克隆抗体均与欧洲鳗鲡和日本鳗鲡有免疫交叉反应。应用变性还原(denatured and reduced)、变性非还原(denatured but non-reduced)和非变性非还原条件下(non-denatured and non-reduced)的免疫印迹(western blot)试验对纯化的Ig进行结构分析，以抗斑点叉尾鮰血清Ig的单克隆抗体和多克隆抗体碱性磷酸酶标记物为探针进行检测。结果表明免疫斑点叉尾鮰血清Ig的重链分子量为72KD，轻链有三条，分子量分别为21KD、23.5KD利26KD；而非免疫斑点叉尾鮰血清Ig中发现有2条重链，分子量分别为72KD和55KD。梯度PAGE和Western blot测得非还原非变性条件下免疫球蛋白的分子量约为900KD。在SDS变性非还原梯度PAGE和Western blot中发现血清Ig出现多种结构形式，分子量分别为870KD、760KD、525KD、330KD利230KD。