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由于对入侵地的生态和经济的重要影响,在过去的20年来,生物入侵成为一个世界范围内研究和防控的焦点。烟粉虱是一种世界性的入侵害虫,Q型烟粉虱是近几年在国际上引起高度重视的一种烟粉虱,现在已经打破地中海/北非起源地的屏障,传播到大约9个国家或地区。在中国,Q型烟粉虱于2003年首次在云南发现后,现今已经蔓延到了20个省市自治区。在2005-2009年间,对山东省7个地区的烟粉虱持续检测表明,山东省只发现B、Q型烟粉虱,并且Q型烟粉虱种群数量逐渐上升,现在已经成为山东省烟粉虱中的优势生物型。本研究对山东省Q型烟粉虱的入侵来源、入侵后的遗传分化情况展开了研究,主要结果如下:
第一,本研究探讨了入侵性B型、Q型烟粉虱的快速分子鉴定方法。首先,利用山东省入侵种群对内切酶VspⅠ、StyⅠ、StuⅠ的有效性进行了验证,同时根据已有的mtCOI序列,分析了内切酶VspⅠ、StyⅠ、StuⅠ酶切位点的多态性,建立了基于3个内切酶的B型、Q型烟粉虱快速、可靠、稳定的鉴别体系。其次,设计并验证了基于核DNA的Q型(Q-F/Q-R) SCAR引物;mtCOI的B型(08BF/08BR)、Q型(08QF/08QR) SCAR引物。通过对B型、Q型烟粉虱SCAR引物的验证发现,这些引物不具有特异性。利用克隆SCAR产物的方法在同一个B型烟粉虱基因组DNA中发现了两组长度为555bp的片段,一组片段与B型烟粉虱mtCOI极度相似(99.6%-100.0%),另一组片段与Q型烟粉虱极度相似(99.3%-99.6%)。同时,在Q型烟粉虱基因组DNA中也发现了极度类似B型烟粉虱mtCOI序列的片段(99.6%-100.0%)。这是烟粉虱Numts的首次报道。烟粉虱Numts的发现,警惕在以后的生物型鉴定和系统发育研究中,要尤其注意线粒体假基因的干扰。
第二,利用mtCOI分子标记,对山东省入侵Q型烟粉虱种群和地中海土著种群的遗传结构进行比较分析。在95条地中海序列中,一共有12条单倍体型,仅有Hap1和Hap2分布于山东省的91条序列中。在土著种群,Hap1和Hap2仅分布在摩洛哥和西班牙,这表明山东省入侵种群可能来自摩洛哥或/和西班牙,在入侵过程中经历了严重的瓶颈效应。基于mtCOI序列的分子变异分析表明,山东省入侵地区和来源地区差异显著。群体间遗传分化指数FST表明,山东省入侵种群与来源种群间已经形成了显著的分化。
第三,鉴于微卫星标记比其他分子标记具有更大的变异程度,在鉴定入侵种的来源上能够提供更大的信息,因此利用微卫星分子标记进一步确定山东省入侵种群的入侵来源。在摩洛哥种群中发现的2个私有等位基因与西班牙种群中的1个私有等位基因,均可在山东省入侵种群中找到。基于微卫星标记,探讨了入侵地区和来源地区种群间与种群内的各项遗传参数,例如遗传多样性、基因交流、遗传变异等。同时比较了入侵地区Q型烟粉虱和来源地区的遗传分化。