脂质代谢是体内重要且复杂的生化反应,指生物体内脂质在各种相关酶的催化下,消化吸收、合成与分解的过程,加工成机体所需要的物质,确保正常生理机能的运作,对于生命活动具有重要意义。脂质沉积是脂质代谢中重要的一部分,涉及到诸多领域,包括畜牧行业家禽家畜的肉质。近年来,天然产物参与成脂调控的研究逐渐成为研究的热点,因此本研究以3T3-L1脂肪细胞为研究对象,通过添加天然小分子龙血素B(Loureirin B),检测其对脂肪细胞的成脂情况及其影响成脂的机制,进而探究其对脂质代谢的影响,从而为调控猪的脂肪沉积提供理论依据。本研究主要获得以下结果:1、在3T3-L1脂肪细胞增殖期加入80μmol/L的Loureirin B处理24h,CCK-8试剂盒检测细胞活力,结果表明80μmol/L的Loureirin B对3T3-L1脂肪细胞的活力无显著影响;2、龙血素B(80μmol/L)对3T3-L1脂肪细胞的增殖有抑制作用。在3T3-L1脂肪细胞增殖期加入80μmol/L的Loureirin B处理48h-72h,利用EdU染色可发现Loureirin B处理可显著降低细胞的数目(P<0.01);RT-PCR检测增殖相关基因的mRNA表达,Western blot检测相关蛋白的表达水平,结果发现Loureirin B处理可显著下调促增殖基因CyclinD、CyclinE的mRNA和蛋白的表达(P<0.01),上调抑增殖基因的P53 mRNA水平(P<0.05),与增殖有关的ERK信号通路中ERK1/2的磷酸化水平下降(P<0.05);流式细胞术检测细胞增殖周期,结果发现Loureirin B处理后,使S期的细胞数目减少,可使细胞的增殖周期阻滞在G2期。3、龙血素B(80μmol/L)显著促进3T3-L1脂肪细胞的成脂与分化。在3T3-L1脂肪细胞的分化期加入80μmol/L的Loureirin B,油红O染色发现与对照组相比Loureirin B能显著促进3T3-L1脂肪细胞内脂滴的合成;RT-PCR和Western blot检测相关基因和蛋白表达水平。结果发现,Loureirin B处理后在mRNA和蛋白水平上,脂合成和脂分解相关基因和蛋白表达量均上升,但脂质合成相关基因的mRNA和蛋白的表达水平上调幅度较高。为了进一步探究Loureirin B促进成脂的机制,我们首先确定了其可能通过GPR120来发挥作用,通过RT-PCR和Western blot结果发现处理组GPR120的mRNA水平和蛋白表达都显著上升(P<0.01),加入GPR120的抑制剂AH7614后,细胞内的脂滴明显减少,通过RT-PCR和Western blot得到的结果与表型一致;进一步研究发现,胰岛素信号通路的敏感性增强,促进了GLUT4的转位,进而促进葡萄糖的吸收,最终促进细胞内脂质的合成。综上所述,80μmol/L的天然小分子龙血素B可显著抑制脂肪细胞的增殖,在分化期可显著促进细胞内脂质的沉积,是一种潜在的促进动物体内脂肪沉积、改善肉品质的候选天然小分子。