转录因子MYB103调控花药发育分子机理及拟南芥中重金属离子转运蛋白的研究

来源 :上海师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhaodaxiang
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本文利用EMS诱变的方法得到了拟南芥雄性不育突变体ms188,用图位克隆方法将该突变基因定位在第五条染色体的K24C1和MDA7两个分子标记之间,该区间包括一个转录因子AtMYB103(At5G56110),序列分析表明,突变体内该基因在第二个外显子上有一个终止突变。我们还从RIKEN突变体库中获得一个转座子插入的AtMYB103突变体,该突变体表型也是不育的。等位实验证明这两个突变体是同一个基因的突变导致不育表型。光镜观察表明在ms188突变体的花药发育中,胼胝质层不能及时降解,导致小孢子不能从四分体中释放出来。电镜观察显示在小孢子发育过程中,花粉外壁不能形成。并且大多数花粉在花药发育晚期已经降解,只有少数的不正常花粉残留在药室中。我们用RT-PCR的方法来寻找被转录因子AtMYB103所调控的下游基因。RT-PCR结果表明胼胝质酶相关基因A6在突变体背景下表达下降,而参与花粉外壁形成的MS2基因则没有表达。这些结果表明,在拟南芥中,AtMYB103通过调控小孢子从四分体的释放和花粉外壁的形成来控制花粉的发育。 由于重金属离子的不可降解的本质,重金属污染已经引起了多方的关注。人类的各种活动比如金属矿石的开采、电镀技术的发展、废气的排放、能源的生产以及肥料和杀虫剂的应用等等,使得重金属污染成为一个严重环境问题。植物修复技术作为一个低成本、高效率、非侵入、符合审美观的技术,利用了植物的富集金属离子及其化合物以及在组织中代谢各种金属离子的显著能力,显示了其在去除环境污染物中的潜力。本论文研究了拟南芥中的两个金属离子转运蛋白ZAT1和IRT1。将其全长cDNA扩增出来,构建在35S表达载体上,最后转入烟草中,过量表达这些金属转运蛋白,以期提高植物的超富集能力。此外,我们还将ZAT1的启动子和GUS基因融合,构建在表达载体上,转入拟南芥来以期观察该基因的表达情况。这些工作为获得富集重金属离子的转基因烟草奠定了基础,将有效地促进植物修复技术的发展和应用。
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