ADMA对THP-1细胞的粘附、迁移和增殖作用的研究

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[目的]ADMA(不对称二甲精氨酸)是一种强烈的内源性NOS抑制剂,被认为是心血管疾病的一个新的危险因子。动脉粥样硬化是慢性炎症性疾病,单核/巨噬细胞在动脉粥样硬化的发生发展过程中起着重要作用。探讨ADMA对人单核细胞(THP-1)的粘附、迁移和增殖的作用。[方法]体外培养人单核细胞(THP-1),实验分为空白组、阴性对照组、ADMA实验组。不同浓度的ADMA(3.75μmol/L、7.5μmol/L、15μmol/L、30μmol/L)与THP-1细胞相互作用不同时间(6h、12h、24h)后,测定MPO的活性来评价它与HUVEC细胞的粘附作用;利用Transwell趋化小室测定ADMA与THP-1细胞相互作用24h后迁移作用;改良MTT法测定ADMA与THP-1细胞相互作用不用时间(24h、48h、72h)后细胞的增殖变化;应用流式细胞仪来测定ADMA与THP-1细胞相互作用不用时间(24h、48h)后对细胞周期的改变。应用SPSS16.0统计学软件包进行统计分析,数据采用单因素方差分析,以P<0.05判定差异具有统计学意义。[结果]①与阴性对照组相比,ADMA(3.75μmol/L、7.5μmol/L)能够增加THP-1细胞与HUVEC细胞粘附率,但差异无统计学意义(P>0.05);ADMA (15μmol/L、30μmol/L)对THP-1细胞与HUVEC细胞粘附率呈浓度依赖性地增加,(P<0.05)。②与阴性对照组相比ADMA (3.75μmol/L、7.5μmol/L)能够增加THP-1细胞的迁移作用,差异无统计学意义(P>0.05);15μmol/L和30μmol/LADMA可明显增加THP-1细胞的迁移作用(P<0.05)。③与阴性组比较,ADMA能够促进THP-1细胞的增殖及活性率;24h时30μmol/LADMA能明显促进THP-1细胞增殖及活性率(P<0.05);48h、72h时不同浓度ADMA能明显促进细胞的增殖及活性率,呈浓度依赖(P<0.05)。④与阴性对照组比较,24h时15μmol/L和30μmol/LADMA能够减少静止期细胞的比例,增加DNA合成期、分裂期细胞数和增殖指数PI(P<0.05);48h时不同浓度ADMA能够减少静止期细胞的比例,增加DNA合成期、分裂期细胞数和增殖指数PI(P<0.05)。[结论]①ADMA能够促进体外培养的人单核细胞(THP-1)与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的粘附作用。②ADMA能够促进在单核细胞趋化因子(MCP-1)作用下的THP-1细胞的迁移作用。③ADMA能够增加体外培养的THP-1细胞的增殖作用。④ADMA能够降低G0/G1期细胞比例,增加S期,G2/M期的比例,减少静止期细胞的比例,增加DNA合成期和分裂期细胞数,使增殖指数增加,改变THP-1细胞的周期,促进细胞增殖。
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