髓样白血病因子(MLF)在日本囊对虾抗病毒抗细菌免疫中的功能研究

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本文主要分为以下几个部分:  第一部分:MLF通过促进血细胞凋亡来减少WSSV复制  MLF在发育、细胞周期、分化和调节RUNX转录因子方面有着重要的功能。然而,MLF在免疫方面的功能还不是很清楚。在本研究中,我们从日本囊对虾中鉴定出一种MLF,并命名为日本囊对虾MLF(MjMLF)。MjMLF全长序列包含1111个核苷酸:包括由816个核苷酸组成的开放阅读框,其中编码含有272个氨基酸的MLFIP结构域。在转录水平上,MjMLF普遍分布在日本囊对虾的多种组织中。表达模式分析说明当白斑综合征病毒刺激日本囊对虾时,MLF在对虾肝胰腺和血细胞中上调表达。RNA干扰实验和过表达(重组蛋白注射)实验说明MjMLF能够抑制白斑综合征病毒在对虾体内复制。流式细胞技术结果表明MjMLF能够促进对虾血细胞的凋亡。所有实验结果揭示MjMLF在日本囊对虾抵制病毒入侵方面起到非常关键的功能。MjMLF作为一种新的调节分子参与降低对虾WSSV复制。  第二部分:MLF通过调节抗菌肽表达来抵制鳗弧菌的入侵  MLF在发育、细胞周期中有重要作用。在人类中关于MLF的研究发现是MLF在细胞周期中主要依赖P53发挥作用。在小鼠中,研究发现MLF可通过从细胞质移位到细胞核发挥功能。我们发现MLF能够抑制日本囊对虾体内的白斑综合征病毒复制。然而,MLF在细菌免疫方面的功能还不清楚。在本研究中,我们发现当对虾受到鳗弧菌刺激时,MjMLF在血细胞、鳃丝和肠组织中上调表达。MjMLF参与对虾血淋巴中的细菌清除,有益于对虾的存活。MjMLF还可参与调控多种抗菌肽的表达。体外pull-down实验发现MjMLF能够结合Mj14-3-3。这些结果说明MLF在对虾抵制细菌入侵中扮演着重要角色。
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