rhEPO对BPD模型肺组织中jak2、stat5表达的影响

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目的:观察重组人促红细胞生成素(recombinant human erythrop oietion,rhEPO)对支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)模型肺组织中jak2,stat5两个因子表达的影响,旨在探讨rh EPO对BPD模型肺组织的保护机制可能与活化jak2/stat5通路信号相关。方法:于孕囊内注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)构造宫内感染环境,并将新生幼鼠生后置于60%高氧等两个可控因素制备BP D模型。在SD大鼠孕第15天分别将LPS和NS(生理盐水)注入孕囊内,从NS注入组所产的新生幼鼠中随机抽取18只做为空气对照组(A组),从LPS注入组所娩出24 h内的新生幼鼠随机选取36只,并分为2组,每组18只:LPS+高氧组(B组)、rhEPO组(C组);A组则将新生幼鼠置于自然空气下,B组及C组生后第1天置于氧浓度为60%的高氧环境中,其中C组则从高氧处理第1天起,予皮下注射rhEPO(1400 IU/kg)。在rhEPO干预前,从LPS及正常孕鼠组所生产的新生幼鼠中随机抽取6只麻醉后,取肺组织HE染色,观察肺组织的病理变化;并于第1、7、14天末从各组随机抽取6只麻醉后,将其断头放血处死,于气管插管维持肺充气状态下迅速取下肺组织,予液氮速冻后存放于-80℃冰箱备用;之后采用RT-PCR及Wester n blot法检测经rhEPO干预BPD模型的新生幼鼠肺组织中jak2,st at5蛋白以及mRNA的表达水平。结果:(1)与A组相比,B组新生幼鼠的肺组织可见肺毛细血管扩张、充血,肺泡间隔及肺泡腔内可见少量炎细胞浸润;(2)与A组相比,B组jak2、stat5蛋白和mRNA表达减少,C组jak2、stat5蛋白和mRNA表达增加;(3)实验第1、7、14天末,各组间jak2、stat5蛋白和mRNA表达的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)SD幼鼠BPD模型造模成功。(2)r hEPO对BPD模型肺组织的保护作用与调控Jak2/Stat5信号通路,上调其表达有关。(3)随着用药时间推移,Jak2和Stat5表达量逐渐增加,推测外源rhEPO促进Jak2/Stat5信号通路活化有一定的时间依赖性。
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