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目的:
通过对用含蛋氨酸饲料喂养建立的同型半胱氨酸大鼠模型的血脂指标的检测和肠道菌群16SrDNA高变区的测序分析，探讨高同型半胱氨酸血症及血脂改变与肠道微生态菌群的关系，为临床研究高同型半胱氨酸血症致病机理及高同型半胱氨酸血症与肠道微生态菌群的关系奠定动物实验基础，并为从调整肠道微生态菌群角度来预防治疗高同型半胱氨酸血症提供理论依据。
方法:
选择清洁级8周龄雄性SD大鼠22只，随机分为2组，分别为正常对照组、高蛋氨酸组，正常对照组大鼠给予标准饲料喂养，高蛋氨酸组在正常饲料中添加1.7％蛋氨酸。待确定建立同型半胱氨酸大鼠模型后采集大鼠血液样本来对胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯以及低密度脂蛋白胆固醇这4项血脂指标进行检测，同时采集粪便提取粪便DNA，应用16SrDNA测序分析技术，对两组大鼠的肠道微生态菌群进行Alpha多样性分析、Beta多样性分析、相对丰度分析。
结果:
1.同型半胱氨酸大鼠模型的建立
蛋氨酸饲料喂养4周后对照组SD大鼠同型半胱氨酸水平为7.3±1.2μmol/L，高蛋氨酸组SD大鼠同型半胱氨酸水平为42.4±21.6μmol/L。通过两组独立样本t检验，P＜0.05，说明两组大鼠血清同型半胱氨酸水平有显著差异，高蛋氨酸组大鼠血清同型半胱氨酸水平明显升高，可以认为已经建立同型半胱氨酸大鼠模型。
2.同型半胱氨酸大鼠脂代谢
蛋氨酸饲料喂养4周后两组SD大鼠血清血脂指标经两组独立样本t检验后，两组SD大鼠血清的甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇检测水平无显著差异。两组SD大鼠血清的高密度脂蛋白胆固醇有显著性差异，高蛋氨酸组大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇水平为0.62±0.09mmol/L，明显低于对照组水平。
3.同型半胱氨酸大鼠肠道菌群变化
3.1Alpha多样性分析
通过测序深度指数Coverage分析证明了两组样本文库的覆盖率较大，样本中序列被测出的概率较高，没有被测出的概率较低，本次测序结果可以代表样本中微生物的真实情况。高蛋氨酸组的Simpson指数较高，但无统计学意义。通过Chaol指数说明可能高蛋氨酸血症对单样本肠道微生物菌群丰度影响较小。
3.2Beta多样性分析
通过主成分分析、主坐标分析以及非度量多维尺度分析说明两组样本的肠道微生态菌群整体组成差异较大。又通过Anosim分析说明两组间肠道微生态菌群的组成差异大于组内肠道微生态菌群的差异。
3.3相对丰度分析
乳杆菌科(Lactobacillaceae)在两组中相对丰度占比较高，且在两组中的相对丰度有显著性差异，在高蛋氨酸组中的相对丰度为8.83％，低于在对照组中的相对丰度19.34％。另外，也发现克里斯滕森菌科(Christensenellaceae)在两组中的相对丰度有显著性差异，在高蛋氨酸组中的相对丰度为2.19％，高于在对照组中的相对丰度0.82％;unidentified_Clostridiales在两组中的相对丰度有显著性差异，在高蛋氨酸组中的相对丰度为1.40％，高于在对照组中的相对丰度0.94％。
乳酸杆菌属(Lactobacillus)在两组中相对丰度占比较高，且在两组中的相对丰度有显著性差异，在高蛋氨酸组中的相对丰度为8.77％，低于在对照组中的相对丰度19.34％。另外，Lactobacillus、Tyzzerella、unidentified_Muribaculaceae、Odoribacter、Alloprevotella在高蛋氨酸组中的相对丰度均明显低于在对照组中的相对丰度，Negativibacillus、Butyrivibrio、unidentified_Clostridiales、Dubosiella、Marvinbryantia、Parabacteroide、unidentified_Christensenellaceae、Allobaculum、Turicibacte、Harryflintia、Pediococcus、unidentified_Erysipelotrichaceae、Caproiciproducens、Enterococcus、Holdemania、Faecalitalea在高蛋氨酸组中的相对丰度均明显高于在对照组中的相对丰度。
结论:
1.用含1.7％蛋氨酸饲料喂养SD大鼠4周后建立高同型半胱氨酸大鼠模型。
2.高同型半胱氨酸血症能够引起肠道菌群改变。
3.高同型半胱氨酸血症组与正常对照组在乳酸杆菌属细菌相对丰度上存在显著性差异。
通过对用含蛋氨酸饲料喂养建立的同型半胱氨酸大鼠模型的血脂指标的检测和肠道菌群16SrDNA高变区的测序分析，探讨高同型半胱氨酸血症及血脂改变与肠道微生态菌群的关系，为临床研究高同型半胱氨酸血症致病机理及高同型半胱氨酸血症与肠道微生态菌群的关系奠定动物实验基础，并为从调整肠道微生态菌群角度来预防治疗高同型半胱氨酸血症提供理论依据。
方法:
选择清洁级8周龄雄性SD大鼠22只，随机分为2组，分别为正常对照组、高蛋氨酸组，正常对照组大鼠给予标准饲料喂养，高蛋氨酸组在正常饲料中添加1.7％蛋氨酸。待确定建立同型半胱氨酸大鼠模型后采集大鼠血液样本来对胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯以及低密度脂蛋白胆固醇这4项血脂指标进行检测，同时采集粪便提取粪便DNA，应用16SrDNA测序分析技术，对两组大鼠的肠道微生态菌群进行Alpha多样性分析、Beta多样性分析、相对丰度分析。
结果:
1.同型半胱氨酸大鼠模型的建立
蛋氨酸饲料喂养4周后对照组SD大鼠同型半胱氨酸水平为7.3±1.2μmol/L，高蛋氨酸组SD大鼠同型半胱氨酸水平为42.4±21.6μmol/L。通过两组独立样本t检验，P＜0.05，说明两组大鼠血清同型半胱氨酸水平有显著差异，高蛋氨酸组大鼠血清同型半胱氨酸水平明显升高，可以认为已经建立同型半胱氨酸大鼠模型。
2.同型半胱氨酸大鼠脂代谢
蛋氨酸饲料喂养4周后两组SD大鼠血清血脂指标经两组独立样本t检验后，两组SD大鼠血清的甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇检测水平无显著差异。两组SD大鼠血清的高密度脂蛋白胆固醇有显著性差异，高蛋氨酸组大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇水平为0.62±0.09mmol/L，明显低于对照组水平。
3.同型半胱氨酸大鼠肠道菌群变化
3.1Alpha多样性分析
通过测序深度指数Coverage分析证明了两组样本文库的覆盖率较大，样本中序列被测出的概率较高，没有被测出的概率较低，本次测序结果可以代表样本中微生物的真实情况。高蛋氨酸组的Simpson指数较高，但无统计学意义。通过Chaol指数说明可能高蛋氨酸血症对单样本肠道微生物菌群丰度影响较小。
3.2Beta多样性分析
通过主成分分析、主坐标分析以及非度量多维尺度分析说明两组样本的肠道微生态菌群整体组成差异较大。又通过Anosim分析说明两组间肠道微生态菌群的组成差异大于组内肠道微生态菌群的差异。
3.3相对丰度分析
乳杆菌科(Lactobacillaceae)在两组中相对丰度占比较高，且在两组中的相对丰度有显著性差异，在高蛋氨酸组中的相对丰度为8.83％，低于在对照组中的相对丰度19.34％。另外，也发现克里斯滕森菌科(Christensenellaceae)在两组中的相对丰度有显著性差异，在高蛋氨酸组中的相对丰度为2.19％，高于在对照组中的相对丰度0.82％;unidentified_Clostridiales在两组中的相对丰度有显著性差异，在高蛋氨酸组中的相对丰度为1.40％，高于在对照组中的相对丰度0.94％。
乳酸杆菌属(Lactobacillus)在两组中相对丰度占比较高，且在两组中的相对丰度有显著性差异，在高蛋氨酸组中的相对丰度为8.77％，低于在对照组中的相对丰度19.34％。另外，Lactobacillus、Tyzzerella、unidentified_Muribaculaceae、Odoribacter、Alloprevotella在高蛋氨酸组中的相对丰度均明显低于在对照组中的相对丰度，Negativibacillus、Butyrivibrio、unidentified_Clostridiales、Dubosiella、Marvinbryantia、Parabacteroide、unidentified_Christensenellaceae、Allobaculum、Turicibacte、Harryflintia、Pediococcus、unidentified_Erysipelotrichaceae、Caproiciproducens、Enterococcus、Holdemania、Faecalitalea在高蛋氨酸组中的相对丰度均明显高于在对照组中的相对丰度。
结论:
1.用含1.7％蛋氨酸饲料喂养SD大鼠4周后建立高同型半胱氨酸大鼠模型。
2.高同型半胱氨酸血症能够引起肠道菌群改变。
3.高同型半胱氨酸血症组与正常对照组在乳酸杆菌属细菌相对丰度上存在显著性差异。