【摘 要】
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目的:探讨脂肪源间充质干细胞(Adipose derived stem cells,ADSCs)对急性移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,aGVHD)患者T细胞的功能影响及其发生机制。方法:分离培养健康人体的脂肪源干细胞,观察细胞形态,培养至第三代,应用流式细胞术进行表面标志物鉴定,同时进行成脂分化及成骨分化鉴定。选取于新疆医科大学第一附属医院血液病中心行造血干细胞
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目的:探讨脂肪源间充质干细胞(Adipose derived stem cells,ADSCs)对急性移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,aGVHD)患者T细胞的功能影响及其发生机制。方法:分离培养健康人体的脂肪源干细胞,观察细胞形态,培养至第三代,应用流式细胞术进行表面标志物鉴定,同时进行成脂分化及成骨分化鉴定。选取于新疆医科大学第一附属医院血液病中心行造血干细胞移植的aGVHD患者,以健康体检者作为对照组,分离外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC),加入植物血凝素刺激PBMC增殖,与ADSCs共培养3天,PBMC:ADSCs=10:1,分为3组:(1)aGVHD患者的PBMC与ADSCs共培养,(2)健康体检者的PBMC与ADSCs共培养,(3)PBMC单独培养。共培养组应用PCR技术检测Th1、Th2亚群特异性转录因子表达水平及HES-1基因表达变化,应用流式细胞术分别检测三组的Th1、Th2亚群变化。结果:(1)吸脂术获取的ADSCs具有多向分化能力,表达CD29、CD44、CD105,而CD31、CD45,CD34弱表达。(2)流式细胞术检测aGVHD患者Th1亚群在CD4+T细胞中所占的比例较对照组高,差异有统计学意义。与ADSCs共培养后Th1亚群有降低趋势,Th2亚群有升高趋势,但无统计学意义。(3)与ADSC共培养后Th1转录因子表达减少,Th2转录因子表达升高,HES-1表达水平降低。结论:aGVHD患者存在Th亚群失衡,主要表现为Th1偏移,ADSCs可能通过减少Th1细胞分化、促进Th2细胞分化,下调Notch信号通路的表达从而纠正免疫失衡。
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