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目的:探究抵抗素导致H9c2心肌细胞肥大是通过调控AMPK/FOXO3a信号通路和自噬活动及其可能的分子机制。方法:培养H9c2心肌细胞,待生长活力良好时,用含胎牛血清浓度为0.1%的培养基对细胞进行饥饿24h。根据实验目的分为两大部分:第一部分将细胞分为4组,分别是Con组:对照组;Res组:抵抗素50 ng/mL组;(Res+Met)组:抵抗素50 ng/m L加二甲双胍2 mmol/L组;Met组:二甲双胍2 mmol/L组。第二部分同样将H9c2心肌细胞分为4组,依次是Con组:对照组;Res组:抵抗素50 ng/mL组;(Res+Rap)组:抵抗素50 ng/mL加雷帕霉素100nmol/L组;Rap组:雷帕霉素100nmol/L组。用Image J分析细胞表面积;BCA法测定单细胞蛋白含量;实时荧光PCR(RT-qPCR)检测心肌肥大相关胚胎基因BNF、β-MHC的表达量;Western Blot检测p-FOXO3a、p-AMPK、p-m TOR、FOXO3a、AMPK、mTOR等通路蛋白表达及自噬相关蛋白Beclin1、LC3表达量。结果:(1)抵抗素能明显增大H9c2心肌细胞表面积(4147±141.7比7554±265.2,P<0.0001),增加细胞内蛋白含量(330.6±23.68比438.1±22.55,P<0.05),并促使心肌细胞内胚胎基因BNF、β-MHC表达上调(P<0.01),AMPK激动剂二甲双胍能抑制上述变化(P<0.05)。(2)经抵抗素处理的心肌细胞,与Con组相比p-AMPK表达量显著降低(P<0.01),pFOXO3a、p-mTOR信号分子表达量明显升高(P<0.01);用二甲双胍干预后再加入抵抗素,p-AMPK较Res组明显升高(P<0.05),而pFOXO3a、p-mTOR表达量较Res组明显降低(P<0.05)。(3)抵抗素处理心肌细胞后,与Con组对比Beclin1、LC3表达量显著降低(P<0.01),用雷帕霉素干预后再加入抵抗素,Beclin1、LC3表达量较Res组显著升高(P<0.05)。结论:(1)抵抗素可以促进H9c2心肌细胞肥大;(2)AMPK/FOXO3a信号通路参与抵抗素诱导的心肌细胞肥大;(3)自噬参与抵抗素诱导的H9c2心肌细胞肥大;(4)mTOR作为连接AMPK/FOXO3a信号通路与自噬的桥梁参与上述改变。综上抵抗素通过下调p-AMPK的表达进而使p-FOXO3a分子表达增加,从而使p-m TOR表达增高抑制了自噬的表达,最终诱导心肌细胞肥大。