皱叶酸模高效再生体系的建立及愈伤组织大黄素含量的分析

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皱叶酸模(Rumex crispus)为蓼科(Polygonaceae)酸模属多年生草本植物,又称土大黄、羊蹄叶子等。其功能主要是清热解毒,通便杀虫等。临床上在对子宫出血、皮癣以及急性乳腺炎的治疗,有很好的疗效。由于皱叶酸模具有重要药用价值,近年来,人们对其进行了大量采挖,伴随着生态环境的恶化,此种野生植物资源迅速减少。为了保护这种药用植物的野生资源,研究者对其进行了愈伤组织诱导、生长点分化、分化芽生根等方面的研究,并成功建立了皱叶酸模的无性系,同时又对野生皱叶酸模及愈伤组织进行了大黄素含量的分析。为大黄素的工厂化生产提供了技术基础。本研究的主要内容及研究结果如下:1.皱叶酸模生长点的分化皱叶酸模生长点分化的理想分化方式是先进行生根培养,再向培养基中加入液态的培养基;分化的理想培养基是MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+蔗糖30g·L-1。2.皱叶酸模愈伤组织的诱导、继代及分化在对皱叶酸模进行愈伤组织诱导时,发现理想的愈伤组织诱导材料为叶柄;最佳培养基为MS+6-BA2.0mg·L-1+2,4-D0.2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+蔗糖30g·L-1;理想的愈伤组织继代培养基为MS+6-BA2.0mg·L-1+2,4-D0.4mg·L-1+蔗糖30g·L-1;愈伤组织分化的理想培养基为MS+ZT0.6mg·L-1+NAA0.4mg·L-1+AgNO30.6mg·L-1+蔗糖30g·L-1。3.皱叶酸模分化芽的生根分化芽生根的结果证明:MS+IAA0.2mg·L-1+蔗糖30g·L-1是皱叶酸模分化芽生根的理想培养基,在恒温光照条件下其生根效果最好,生根率高达100%,每株试管苗的平均生根数为6.35条、每条根的平均长度为10.54cm。4.试管苗的移栽和定植在没有经过炼苗的情况下,皱叶酸模试管苗的移栽,无论是移植到添有1/2河沙和1/2园土的花盆中,还是在室外,其成活率都为100%。定植成功的试管苗长势良好,并保持了野生皱叶酸模的生物学性状。5.皱叶酸模中大黄素含量的分析对皱叶酸模的根部、叶片以及愈伤组织进行分析,结果表明:各部分都含有一定量的大黄素,其中根部大黄素的含量为7.70%,叶片中大黄素的含量为3.08%,愈伤组织中大黄素的含量为6.24%。
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