17β-雌二醇对大鼠移植肝缺血再灌注损伤保护的实验研究

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第一部分:大鼠肝移植模型的建立目的:改良二袖套法建立稳定的大鼠肝移植模型方法:通过摸索,在供、受体麻醉,取肝,肝上下腔静脉的吻合,围手期的处理等几个方面进行改良,共实施大鼠原位肝移植动物模型120例,观察术后并发症及存活率。结果:经过120例次的训练,建立了稳定的大鼠原位肝移植模型。在后40例,受体平均无肝期为15分钟,受体手术时间为45分钟,手术成功率95%,两周存活率90%。结论:改良二袖套法具有手术成功率高,无肝期短,重复性好等优点,是大鼠原位肝移植的理想术式。第二部分:17β-雌二醇对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用目的:探讨17β-雌二醇对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法:健康雄性SD大鼠180~220克,共36只,配成18对,随机分成3组:A组:缺血再灌注组;B组:缺血再灌注+雌二醇组(100ug/kg);C组:缺血再灌注+雌二醇组(500ug/kg)。其中B组受体术前每日腹腔注射17β-雌二醇100ug/kg,共七天;C组受体术前每日腹腔注射17β-雌二醇500ug/kg,共七天;A组受体术前每日腹腔注射同等量的溶剂,共七天。然后改良二袖套法行肝移植术。门静脉复流后观察三组移植肝胆汁分泌情况,术后6小时处死受体,检测血浆中ALT、AST水平和雌二醇浓度。取肝组织,电镜下观察肝组织的超微结构,TUNEL法检测肝细胞的凋亡情况,免疫组化法检测TNF-α和NF-κB的表达。化学法测定血清中MDA、MPO含量。结果:A组、B组、C组的血清雌二醇浓度依次增加,且每两组之间的血清雌二醇浓度有统计学差异(均P<0.05)。B组、C组的胆汁量显著多于A组,且B组的胆汁量最多(均P<0.05)。B组、C组的ALT、AST水平显著低于A组,且B组水平低于C组(均P<0.05)。B组、C组的MDA、MPO低于A组,且B组的MDA、MPO最低(均P<0.05)。TUNEL法检测显示B组、C组的凋亡情况显著轻于A组,且B组的凋亡情况轻于C组。免疫组化法TNF-α和NF-κB在A组表达最明显,B组、C组表达均少于A组,B组表达最少。电镜下B组、C组肝细胞损伤显著轻于A组。结论:1.雌激素对大鼠移植肝缺血再灌注损伤有保护作用。2.雌激素对大鼠移植肝缺血再灌注损伤保护作用的机制有:①抑制TNF-α和NF-κB的表达;②抑制中性粒细胞的聚集和活化;③减轻脂质氧化程度。3.适当的血清雌激素浓度对大鼠肝脏I/R损伤具有最佳的保护作用。
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