本实验室在前期研究中确定了玉米大斑病菌中存在着3条MAPK途径，其中HOG-MAPK途径参与调控病菌的高渗胁迫反应，推测玉米大斑病菌水甘油通道蛋白基因位于HOG-MAPK途径的下游参与病菌的渗透胁迫反应。本研究拟在此基础上，从玉米大斑病菌基因组数据库中搜索得到水甘油通道蛋白基因，利用基因敲除技术创制该基因敲除突变体，通过比较突变体与野生型菌株在菌丝及分生孢子发育、对高渗胁迫的反应及致病性等的差异，明确该基因的功能。主要研究结果如下：1)利用JGI网站（http://genome.jgi-psf.org/）公布的玉米大斑病菌的基因组序列，查找得到了玉米大斑病菌水甘油通道蛋白基因序列。生物信息学分析表明，在玉米大斑病菌中存在FPS1-like和Yfl054-like两类水甘油通道蛋白。2)克隆得到玉米大斑病菌水甘油通道蛋白基因StFPS1，该基因DNA全长为1393bp，cDNA全长为1179bp，含有4个内含子，5个外显子。3)以pBS-pUC质粒为基本骨架，成功构建了玉米大斑病菌水甘油通道蛋白StFPS1基因敲除载体，重组载体经PEG3350介导进行原生质体转化，用50μg/mL潮霉素B筛选到27株转化子，进一步利用特异引物PCR、RT-PCR、Southern blotting筛选得到了1株StFPS1基因敲除突变体△StFPS1。4)玉米大斑病菌StFPS1基因敲除突变体菌落生长速率降低、菌丝发育异常、不产生分生孢子，说明StFPS1基因参与调控病菌菌丝及分生孢子的发育。5)玉米大斑病菌水甘油通道蛋白基因敲除突变体的细胞壁明显变薄、细胞壁对细胞壁合成抑制剂的敏感性增加，说明StFPS1对病菌的细胞壁发育和完整性具有调控作用。6)玉米大斑病菌水甘油通道蛋白基因敲除突变体在高渗胁迫条件下菌落生长速率增加、菌丝细胞膨大、细胞内甘油含量为野生型菌株的3倍以上，说明StFPS1参与病菌的高渗胁迫反应，并起负调控作用。7)玉米大斑病菌水甘油通道蛋白基因敲除突变体的HT-粗毒素毒力和组分与野生型菌株没有差异，胞壁降解酶活性和对寄主的侵染能力没有改变，说明StFPS1基因对病菌产生毒素和胞壁降解酶活性没有调控作用。