VB₂是黄素酶类的两种辅酶:黄素单核苷酸和黄素、腺嘌呤二核苷酸的组成成分,在生物氧化过程中起递氢作用,参与机体糖、蛋白质和脂肪的代谢。长期缺乏VB₂,会出现舌炎、口腔炎、嘴角烂、眼睛疲劳、白内障等疾病。VB₂在体内不能合成,需靠外源供给。谷物是人体VB₂的主要来源之一。因此,建立一种简便、准确、快速测定谷物中VB₂的分析方法具有重要的现实意义。目前,荧光法测定蔬菜、药片中VB₂的报道较多。但是,将提取蔬菜,药片中VB₂的方法用于提取谷物中的VB₂效果不太理想。本文对VB₂的提取方法进行了改进和优化,通过单因子试验和正交试验分析研究了不同提取液、提取方法和提取条件对谷物中VB₂的提取效果的影响。采用荧光分析法,在激发波长λex=444.0 nm和发射波长λem=528.0 nm时,测定谷物中VB₂的含量。结果表明,选取H3PO4为提取液,用水浴回流法,当提取液浓度0.1 mol/L,提取时间45 min,溶液的pH值为5.0时,提取效果最佳,且回收率可达到89.20%～100.32%,变异系数可控制在1.21%。精密度和准确度良好。水溶性小分子有机溶剂在盐的作用下能够形成双水相体系用于目标物质的萃取。正是基于此,提出了异丙醇-盐-水体系双水相萃取VB₂的新方法。研究了不同有机物、不同有机物用量、不同pH值以及外加少量无机盐对异丙醇分相能力的影响。试验结果表明:在最佳条件下,异丙醇- MgSO4-H2O体系对VB₂的一次性萃取率为97.6 %～98.4 %。方法的检出限为1.6×10-2 mg/L。该方法用于谷物中VB₂的测定,相对误差为1.22% ,与传统的液-液萃取和固相萃取比较,本方法具有操作简便、成本低、干扰小、低毒低能耗等显著特点。