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从甜叶菊中提取的甜菊糖甙不仅具有高甜度、低热量的特点,而且还有对酸、碱、盐稳定、不会引起美拉德反应等诸多优点。我国对甜菊糖甙的提取及精加工技术与国外仍有很大的差距,且甜菊糖甙的后苦味也使其应用受到了极大的限制。因此,开展甜菊糖甙的提取、精制和味质改善等研究将根本解决我国甜菊糖甙的技术难题。本研究以甜叶菊为原料,对甜菊糖甙的提取、絮凝及精制等进行了系统的研究,以制备高纯度的甜菊糖甙,并对甜菊糖甙的组分分离进行了一定的研究。
1.在甜菊糖甙提取工艺实验中,以水为溶剂,恒温振荡提取甜菊糖甙。通过单因素实验和响应面实验(RSM)优化得到的最优提取工艺条件为:浸提时间50min、浸提温度70℃、液料比12,提取次数四次。该工艺的甜菊糖甙得率可达到10.78%。
2.对酶法浸提甜菊糖甙的条件进行了研究,得出的最优条件为:浸提温度45℃~50℃,pH值4.5~5.0,料水比1∶8,纤维素酶的用量0.2%(酶g/干物质g),加酶方式为四次加酶四次提取。每次时间40min,与传统高温水提工艺相比,低温酶法浸提甜菊糖甙的得率提高了9.5%左右,所得甜菊糖甙的纯度提高了57%左右。
3.对甜叶菊提取液进行了絮凝除杂研究,结果表明:FeCl<,3>+CaO+PAM作为絮凝剂时效果最好,其适宜絮凝条件为:FeCl<,3>∶CaO=1∶2.5,总用量为4.5g/L,PAM用量50mg/L,调节溶液pH值9~10,搅拌速度60r/min;置于65℃~70℃的水浴中作用30min左右。这样可使其脱色率达到96%以上,甜菊糖糖甙损失率为11%左右。
4.通过D-06#、AB-8、D101和NKA-9四种大孔吸附树脂对甜菊糖甙吸附和解吸性能的比较,最适合精制甜菊糖甙的大孔吸附树脂为D-06#树脂,并确定了上柱条件。得到的解吸液还需进行树脂脱色处理,通过比较确定D941型树脂的脱色效果最好。
5.用不同比例甲醇、异丙醇和水的混合溶剂对甜菊糖甙以及经一次结晶分离出的甜菊糖甙的母液分别进行重结晶实验,结果表明:一次结晶溶剂选用无水甲醇,当甲醇:甜菊糖甙=2(质量比)时可得到RA甙相对含量最高的初级母液,向初级母液中加入25%的异丙醇并将母液浓缩至原体积的20%时析出晶体的重量以及RA甙的含量都最大。将得到的高RA甙晶体再在甲醇-水体系中多次重结晶,可得到纯度大于91%的莱鲍迪甙A。并对其进行了HPLC表征,为莱鲍迪甙A的分离与纯化提供了一种简便的方法。