自2000多年前,希波克拉底命名癌症以后,癌症就像噩梦一样一直困扰着人类。随着社会变迁以及人类生活方式的转换,癌症的发病率也在不断增加。医学发展到21世纪,癌症依然是亟待解决的世界性难题,而抗癌药物是治疗癌症的主要手段之一。天然来源的化合物是发掘新药的一个重要途径。据统计,目前市面上销售的药物中,约有50%来自于天然产物及其衍生物。由于海洋环境的高盐、高压以及光照少等完全不同于陆地环境,导致海洋来源的天然产物具有结构新颖、活性强等特点。近年来,一大批海洋天然产物被发现,其中尤其以抗氧化及抗肿瘤活性最为引人瞩目。氧化自由基在人体内对于肿瘤的发生起到促进作用,而抗氧化剂能够消除自由基从而有助于减缓癌症的发展。海鞘作为一种海洋被囊动物,在开发抗肿瘤药物领域具有其独特的优势,已有研究报道从海鞘体内分离获得具有明显抗氧化及抗肿瘤活性物质。而我国南海海域海鞘分布广泛,其中皱瘤海鞘为其优势种;另外,以前的研究往往将海鞘当成一个整体,事实上海鞘的被囊和内脏团存在明显的差别。因此该研究侧重从皱瘤海鞘不同部位活性物质的抗氧化及抗肿瘤活性开展研究,且对该组分的抗氧化及抗肿瘤机理进行探究。这些研究为进一步开发海洋药物奠定了一定的基础。主要研究结果如下:1、针对皱瘤海鞘被囊,利用缓冲液提取、超滤截留分离得到四种不同分子量级的被囊多肽,分别研究其抗氧化活性。同时检测了四种分子量级多肽对人宫颈癌HeLa细胞生长的影响,2、进一步利用配备C18半制备色谱柱的高效液相色谱系统以及生物活性追踪的方法,由皱瘤海鞘(Styela plicata)被囊的小于3K多肽组分中分离纯化出一种能抑制人宫颈癌HeLa细胞生长的多肽SP336,高分辨质谱分析表明其分子量为336道尔顿。此外,采用甲醇提取、硅胶柱层析等分离方法,结合活性跟踪的方法,从皱瘤海鞘内脏团中分离纯化出一种能诱导癌细胞凋亡的成分VCEF-6。细胞活性检测结果显示该组分能够显著抑制两种人肿瘤细胞在体外的生长,而且具有量效关系,并且对人正常胚肾293FT细胞毒性很低。3、为进一步研究VCEF-6的作用方式,我们分别从形态学研究、Annexin V/FITC染色、细胞凋亡分析、细胞周期阻滞等方面开展了相关研究。结果发现VCEF-6能够引发HeLa及A549细胞凋亡,可使HeLa细胞的分裂周期被阻滞在G0/G1期,影响细胞增殖。综合以上结果,我们初步推断VCEF-6通过阻滞细胞周期进而引发人宫颈癌HeLa细胞的凋亡。研究结果表明,皱瘤海鞘可以作为发掘一种潜在的抗肿瘤化合物的宝贵资源,由于皱瘤海鞘活性组分VCEF-6对两种人肿瘤细胞具有很高的细胞毒活性,而对人正常细胞毒性又较低,有望进一步开发为一类新型抗肿瘤药物。对VCEF-6的肿瘤细胞生长抑制作用的机制进行了初步的探索,表明VCEF-6导致肿瘤细胞的分裂周期被阻滞在G0/G1期,进而导致细胞生长受到抑制。然而,对VCEF-6诱导的细胞凋亡的确切机制尚不清楚,该成分与细胞信号分子之间的相互作用需要进一步开展研究。