【摘 要】
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目的:食管癌相关基因4(ECRG4)是关键的细胞周期调控蛋白之一。研究显示ECRG4在包括食管癌、肺癌、乳腺癌和胃癌等多种肿瘤的发生和发展中起着重要的作用,并且ECRG4表达水平的高低与患者预后密切相关,提示ECRG4是一个重要的癌症调控基因。但ECRG4是否同样参与了结肠癌的发生和发展,目前仍不明确。方法:收集行外科手术治疗的结肠癌患者的结肠癌组织和癌旁组织,Western blot和实时荧光定
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目的:食管癌相关基因4(ECRG4)是关键的细胞周期调控蛋白之一。研究显示ECRG4在包括食管癌、肺癌、乳腺癌和胃癌等多种肿瘤的发生和发展中起着重要的作用,并且ECRG4表达水平的高低与患者预后密切相关,提示ECRG4是一个重要的癌症调控基因。但ECRG4是否同样参与了结肠癌的发生和发展,目前仍不明确。方法:收集行外科手术治疗的结肠癌患者的结肠癌组织和癌旁组织,Western blot和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测ECRG4的蛋白和mRNA表达水平,免疫组织化学染色法检测ECRG4在组织中的定位和表达。通过检索癌症基因组图谱(TCGA)数据库中有关结肠癌患者的数据集,分析ECRG4在正常结肠组织和结肠癌组织中的表达,以及结肠癌组织中ECRG4的表达水平与患者预后的关系。体外培养人原位结肠癌细胞株HCT-116细胞,使用小干扰RNA(siRNA)转染HCT-116细胞48小时沉默ECRG4,Western blot和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测ECRG4的蛋白和mRNA表达水平,验证转染效率。使用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的5-乙炔基-2-脱氧尿苷(Edu)检测干扰ECRG4表达后HCT-116细胞的增殖能力;Western blot检测转染siRNA 48小时后HCT-116细胞中cleaved caspase 3的蛋白表达水平,评估肿瘤细胞的凋亡程度;Transwell小室检测沉默ECRG4表达后HCT-116细胞的迁移和侵袭能力。结果:1)与正常结肠组织和结肠癌癌旁组织相比,ECRG4的表达主要定位于细胞的胞浆中,并且ECRG4在结肠癌组织中的蛋白和mRNA表达水平均明显降低;2)结肠癌患者结肠癌组织中ECRG4表达的水平越低,预后越差;3)使用siRNA转染HCT-116细胞,可以显著下调ECRG4的蛋白和mRNA表达水平;4)沉默ECRG4的表达促进结肠癌细胞株HCT-116细胞的增殖;5)下调ECRG4的表达抑制结肠癌细胞株HCT-116细胞的凋亡;6)在HCT-116细胞中沉默ECRG4的表达促进肿瘤细胞的迁移和侵袭。结论:1)ECRG4的表达水平的高低是判断结肠癌患者预后一个潜在指标;2)ECRG4表达降低可能通过促进结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭以及抑制细胞的凋亡促进结肠癌的发生和发展。
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