葛根提取物对更年期骨质疏松症的功能性研究

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葛根是中医常用的祛风解表药,近几十年的研究证明葛根异黄酮具有明显的活血化淤作用,对高血压、冠心病、心肌梗塞等具有较好的疗效。葛根主要活性成分是以葛根素为主的异黄酮类化合物,另外还含有大豆苷、大豆苷元、染料木素等已被证明具有抗骨质疏松症作用的大豆异黄酮,而葛根素与大豆异黄酮在化学结构上比较相似,是大豆苷元的葡萄糖苷,因此理论上葛根对骨代谢可能有改善作用。但迄今为止,在现代中医临床上,葛根及其主要有效成分尚未用于骨质疏松症及其相关症状的治疗。而事实上,在一、二百年前,我国和泰国就有应用葛根减轻妇女更年期不适应症的记载。本实验以去卵巢的雌性成年大鼠作为更年期骨质疏松模型,观察葛根提取物对去卵巢大鼠骨—钙代谢的作用。实验包括:一、葛根提取物总异黄酮和葛根素含量的测定总异黄酮含量测定以葛根素为标准品,采用紫外分光光度法。测定结果:葛根提取物A中总异黄酮含量为33.38%,葛根提取物B中总异黄酮含量为95.62%。葛根素含量测定以葛根素为标准品,采用高效液相色谱法(HPLC)。测定结果:葛根提取物A中葛根素含量为14.14%,葛根提取物B中葛根素含量为89.69%。二、葛根提取物对更年期骨质疏松的功能性研究90只3月龄SD雌性成年大鼠,手术切除双侧卵巢后5天分别给予葛根提取物A10mg/kg(OVX-A-10),20mg/kg(OVX-A-20),40mg/kg(OVX-A-40)、葛根提取物B5mg/kg(OVX-B-5),10mg/kg(OVX-B-10),20mg/kg(OVX-B-20)或己烯雌酚(,雌激素,阳性对照组,OVX-E) ,连续喂养3个月;同时设假手术组(未切除双侧卵巢,为正常对照组,Sham)和去卵巢模型组(OVX)。除假手术组和去卵巢模型组外,其它各组大鼠每日晨用葛根提取物或己烯雌酚灌胃处理。动物实验结束后立即处死,称重并收集骨骼及血液样品。测定大鼠骨骼形态学指标(骨长、骨鲜重、骨近中远三点横径),胫骨矿物质含量,胫骨中钙、磷、锌、镁的含量,血清中Ca、P含量和碱性磷酸酶(ALP)活性,股骨密度和肱骨生物力学性能等。结果表示:(1)与去卵巢组相比,OVX-A-20、OVX-A-40、OVX-B-10、OVX-B-20组胫骨钙含量显著增加,分别增加了52.7%,72.9%,72.1%,76.7%;(2)OVX-A-40、OVX-B-10、OVX-B-20<WP=8>组的股骨密度较去卵巢组显著增加,分别增长了4.7%,4.5%,5.8%;(3)服用葛根提取物的各组大鼠的肱骨强度与去卵巢组相比均有显著的提高,其中以OVX-A-40组和OVX-B-20组最为明显,分别增加了4.4%,4.7%;(4)葛根提取物能显著降低ALP活性,从而抑制骨的高转换状态。从本实验可以得出:1、葛根提取物对去卵巢大鼠具有增加骨密度,增强骨强度,改善骨质疏松的作用;2、葛根提取物对骨质疏松的疗效与剂量有一定的相关性。葛根提取物A在10mg/kg-40mg/kg范围内对去卵巢大鼠的骨质疏松有改善作用,以40mg/kg最为有效。葛根提取物B在5mg/kg-20mg/kg范围内对去卵巢大鼠的骨质疏松有改善作用,以10mg/kg和20mg/kg最为有效;3、葛根中的异黄酮对更年期骨质疏松症有明显的改善作用,并且葛根素是葛根中改善更年期骨质疏松症的主要功能性成分。三、葛根提取物的急性毒理学实验小鼠20只(雌雄各半),随机分为2组,每组10只。以总异黄酮600mg/kg(临床推荐剂量(100mg/人.天)的300倍)作为给药剂量一次性灌胃,观察两星期内的死亡率。结果显示:两星期内葛根提取物A和B两组小鼠均无死亡,表明葛根提取物没有明显的毒性。因此葛根是一种很有前景的改善更年期骨质疏松症的天然产物。
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