背景:主动脉夹层（aoritc dissection AD）是一种死亡率较高的疾病,其主要特点是起病急且病程进展快。许多患者在得到明确诊断前或手术治疗前往往因夹层破裂死亡而失去治疗机会。高血压与AD的发生密切相关,在高血压所带来的机械牵张下,血管平滑肌细胞（VSMC）的表型发生转化,由生理状态下的收缩型向分泌型转化,导致基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinases MMP-9）分泌增加。MMP-9可降解多种细胞外基质,破坏诸如各种胶原蛋白、弹性蛋白、纤连蛋白等,进而破坏细胞与细胞间结构的稳定性,导致主动脉壁结构重构,血管壁中层对于高血压的机械抗性降低,主动脉更易被撕裂形成夹层。mi R-145对于VSMCs收缩表型的维持以及在调节VSMCs分化中起到重要的作用。mi R-145通过调节Kruppel样因子4（Kruppel Like Factor 4 KLF4）的表达参与调控VSMC增殖与分化。在血管损伤后,KLF4和VSMC分化标记基因的启动子/增强子区域结合增加,从而促进了VSMC的表型转化。然而目前尚不清楚mi R-145在机械拉伸下调控VSMC表型转化的分子机制。方法:运用β-氨基丙腈（β-aminopropionitrile BAPN）联合血管紧张素II（angiotension II Ang II）构建SD大鼠AD模型。通过Western Blot和免疫组化分析MMP-9在AD模型动物和AD患者主动脉血管壁中的表达差异。采用RT-qPCR分析hsa-miR-145-5p在AD组织中的表达情况。运用组织块贴壁法培养AD病人主动脉壁的VSMCs,差异贴壁法纯化细胞。通过机械牵张研究VSMC表型标志物的变化情况。通过分析mi R-145相关的蛋白质-蛋白质相互作用网络以及Wikipathways研究hsa-mi R-145-5p调控的VSMC表型转化途径。通过RNA干扰技术分别干扰hsa-mi R-145-5p与KLF4的表达。运用Western Blot分析了hsa-mi R-145-5p与KLF4对VSMC收缩型和分泌型表型标志物表达的影响,并评估了机械拉伸条件下主动脉中hsa-mi R-145-5p对KLF4的调节作用。结果:运用BAPN联合Ang II的方法构建SD大鼠AD模型其主动脉夹层发生率远高于单独运用BAPN或者Ang II的方法,主动脉夹层发生率分别为80%、45%和15%。HE病理染色切片显示了主动脉假腔的形成且有大量红细胞充盈,证实了夹层的发生,我们进一步通过Victoria blue病理染色发现了夹层血管中疏松的弹力纤维且可见弹力纤维多处断裂,血管结构连续性被破坏。Western Blot结果显示夹层血管壁组织中MMP-9表达较正常组织增加。来自Genecards的GTEx和Bio GPS的生信分析结果显示,has-mi R-145-5p在正常人的动脉组织中大量表达（读取次数超过100 M）,结合RT-q PCR分析结果,我们发现与正常主动脉组织相比,hsa-mi R-145-5p在AD动物和AD病人的主动脉血管壁中显着下调。通过改良后的血管壁组织块贴壁法可以获得较高数量的原代VSMC,所需的培养周期较短,通过差异贴壁法纯化培养获得的VSMC经免疫组化鉴定具有较高的纯度。我们发现VSMC收缩型相关蛋白α-SMA、SMA22α在一定力度大小的机械牵张下表达下调,而分泌型相关蛋白PCNA、OPN的表达增加。我们通过生物信息学分析研究了KLF4参与VSMC的分化,并研究了hsa-mi R-145-5p与KLF4之间的关系。通过干扰KLF4的表达我们发现VSMC收缩型标志物的表达下调。而通过转染使VSMC的hsa-mi R-145-5p过表达则可抑制KLF4蛋白,进而下调VSMC中的收缩表型相关蛋白表达,从而抑制了VSMC在机械牵张诱导下的表型转化。结论:MMP-9参与了AD的发生发展,而主动脉夹层的发生的病理机制之一是分泌型VSMC的增加,机械拉伸通过上调KLF4进而诱导VSMC的表型转化,进而促进了AD的发生发展。而该机制受hsa-mi R-145-5p调控,后者直接调节KLF4表达进而调控了VSMC分化。