论文部分内容阅读
研究背景及目的:胰腺癌是腹部常见的一种高度恶性肿瘤。随着人类遗传学的深入研究,人们认识到癌基因的激活和抑癌基因的失活以及一些其他肿瘤相关基因的变异会导致肿瘤的发生。SH3GL2基因是一种潜在的抑癌基因,在人体内广泛表达,但主要表达于中枢神经系统中,在其它组织中表达量相对下调。最新的研究发现,在人脑胶质瘤、喉癌、乳腺癌、胃癌以及卵巢癌组织中SH3GL2的表达明显下调,但在胰腺癌中的表达情况没有相关的报道。本研究旨在通过检测三株不同侵袭转移能力的胰腺癌细胞株(BxPC-3、PANC-1及Mia PaCa-2)和正常人胰腺细胞株(H6C7)中SH3GL2mRNA及蛋白水平的表达,进一步应用免疫组化技术检测人胰腺癌石蜡标本中SH3GL2蛋白的表达,并分析其与临床病理特征的关系。初步分析SH3GL2在胰腺癌中的表达情况,并揭示SH3GL2的表达与胰腺癌不同分化水平及临床病理特征的关系。为进一步研究SH3GL2在胰腺癌侵袭转移中的作用机制奠定基础。研究方法:1.采用QRT-PCR技术检测人正常胰腺细胞株(H6C7)和三株不同侵袭转移能力的胰腺癌细胞株(BxPC-3、PANC-1及Mia PaCa-2)中SH3GL2基因mRNA表达水平的差异;2.Western Blot技术检测人正常胰腺细胞株(H6C7)和三株不同侵袭转移能力的胰腺癌细胞株(BxPC-3、PANC-1及Mia PaCa-2)中SH3GL2蛋白表达水平的差异。3.以免疫组化技术检测在正常胰腺组织和不同分化程度的胰腺癌组织中SH3GL2蛋白的表达差异。4.分析SH3GL2的表达与胰腺癌临床病理特征的关系。研究结果:1.QRT-PCR检测发现,SH3GL2mRNA在正常胰腺细胞株(H6C7)和三株不同侵袭转移能力的胰腺癌细胞株(BxPC-3、PANC-1及Mia PaCa-2)中均有表_达。与内参β-actin表达相比,将所测的2-ΔΔC(t)值用x±s表示,BxPC-3细胞中SH3GL2表达值为14.330±0.254;PANC-1细胞中SH3GL2表达值为7.768±0.341;Mia PaCa-2细胞中SH3GL2表达值为1.008±0.007;H6C7细胞中SH3GL2表达值为16.284±0.216;任意两者之间比较p<0.05有统计学意义。SH3GL2在四种细胞中的表达情况为:H6C7﹥BxPC-3﹥PANC-1﹥Mia PaCa-2。2.Western Blot验证SH3GL2蛋白在正常胰腺细胞株(H6C7)和三株不同侵袭转移能力的胰腺癌细胞株(BxPC-3、PANC-1及Mia PaCa-2)中的表达,与QRT-PCR结果相似,SH3GL2在四种细胞中的表达情况为:H6C7﹥BxPC-3﹥PANC-1﹥Mia PaCa-2。3.免疫组织化学检测发现,SH3GL2蛋白在正常胰腺组织和三种不同分化程度的胰腺癌组织中均有表达,且胰腺癌组织分化程度越低,SH3GL2基因的表达水平越低。SH3GL2蛋白主要定位在细胞质,与前面研究相符合。4.SH3GL2蛋白在胰腺癌组织中的表达与年龄、性别、肿瘤直径、淋巴结转移无关(p>0.05),与分化程度、TNM分期有关(p <0.05)。结论:1.SH3GL2mRNA及蛋白在胰腺癌细胞中表达下调,且随着胰腺癌分化程度的降低,其表达下调越明显。2.SH3GL2在胰腺癌组织中表达下调,其表达水平与胰腺癌的细胞分化程度及TNM分期密切相关。