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目的:观察盐酸青藤碱对晰star大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型的临床表现、病理改变及炎症因子表达的影响,并探讨其对EAE的预防治疗作用及可能机制,为临床应用治疗MS提供基础实验依据。
方法:
(1)模型制备:用豚鼠脊髓匀浆(guinea.pig spinal cord homogenate,GP-SCH)+完全福氏佐剂(complete freunds adguvant,CFA)+百日咳疫苗(pertussis vaccine,PV)原浆液免疫雌性6~8周龄Wistar大鼠,建立EAE发病模型。
(2)实验动物分组:50只Wistar大鼠随机分成EAE组、盐酸青藤碱组(100mg/kg)、激素干预组(5mg/kg)和空白对照组,前三组各15只,空白对照组5只。
(3)发病大鼠处理:分别于EAE发病初期(第11天)、发病高峰期(第15天)、发病缓解期(第21天)取发病动物脑部和脊髓制成标本。进行常规眦染色和LFB髓鞘染色,光镜下观察其病理变化。用免疫组化法检测各组发病大鼠大脑标本切片中IFN-γ、IL-12的表达情况。
(4)实验结果处理:所有实验数据用SPSS11.5软件包进行统计学分析。
结论:
(1)IFN-γ、IL-12的表达水平与EAE病情的严重程度呈正相关,即随着病情的加重而升高,随着病情的缓解而下降。从而,推测IFN-γ、IL-12在EAE发病中可能起促进炎症发展的作用。
(2)盐酸青藤碱可在一定程度上有效地干预大鼠EAE发病,缓解病情发展。其机制可能与减少促炎因子IFN-γ、IL-12的分泌,调节Th1/Th2细胞因子的平衡有关。