自2006年Yamanaka研究小组首次成功地从小鼠胎儿成纤维细胞诱导得到诱导多能性干细胞(Induced pluripotent stem cells,i PSCs)以来,由于i PS细胞潜在的广阔应用前景而迅速成为干细胞研究领域的新热点。高质量的i PS细胞可以获得有生殖系传递能力的嵌合体,以及通过四倍体补偿技术获得完全由i PS细胞发育来的小鼠。目前,绝大部分供研究用的小鼠多能干细胞系为雄性,科学家对雌性小鼠的多能干细胞细胞系的研究甚少,包括商业公司所提供的小鼠多能干细胞系也多为雄性。因此,高质量的雌性i PS细胞系对于科研应用以及研究人类雌性多能干细胞的临床研究就显得尤为重要。我们通过调查研究发现,现在诱导i PS的体系多以混合性别的小鼠胎儿成纤维细胞为材料,即MEF细胞来源于多只小鼠胎儿。我们进行了比对研究,用混合性别的MEF为材料进行从头诱导,得到的i PS细胞系性别比例发生严重失衡,雄性多能干细胞的克隆数量明显高于雌性多能干细胞。本试验所用起始细胞的数量和传代次数等控制一致,雄性MEF细胞的比例分别0%,10%,30%,50%和100%,诱导成为雄性i PS细胞的比例分别为0%,19.9±2.8%,68.2±5.4%,85.9±6.8%和100%。但是当通过对不同品系的初始细胞,不同的病毒感染组合以及不同批次之间的单一性别的细胞进行诱导,发现其效率没有明显差异。建系的雌性i PS细胞核型正常,具有与ES细胞相似的典型特征,包括,倍增速度快,成集落状生长,具有较高碱性磷酸酶活性,表达ES细胞表面特异性抗原,表达ES细胞所有的多能基因,多能基因启动子区域保持低甲基化状态。i PS细胞在体外常规培养后可自发形成类胚体,且有自发分化能力。将i PS细胞注入免疫缺陷小鼠体内后,约4周,可形成的畸胎瘤,经过切片、染色后可见典型的三胚层结构。i PS细胞可通过嵌合体试验获得具有生殖系传递能力的嵌合体小鼠,其中最重要的是,能够通过四倍体胚胎补偿技术这个检测ES细胞多能性的黄金法则获得完全有i PS细胞发育而来的雌性小鼠。混合性别比例诱导获得的雌性i PS细胞系没有能够通过四倍体胚胎补偿技术获得完全由i PS细胞发育而来的雌性小鼠。这些结果表明,高效的获得高质量的雌性i PS细胞须通过对雌性细胞的单独诱导来实现,高质量雌性干细胞对于临床研究具有实际意义,为研究人类或其他物种的多能干细胞打下基础。