论文部分内容阅读
目的探讨强力霉素（Doxycycline，Dox）对大鼠骨髓来源树突状细胞（rat bone marrow-derived dendritic cells，RBM-DCs）表型及功能的影响。方法无菌分离SD大鼠骨髓细胞，经重组大鼠粒—巨噬细胞集落刺激因子（recombinated rat granulocyte-macrophage colony-stimulating factor，rrGM-CSF） 4ng/ml+重组大鼠白介素4（recombinated rat interleukin—4，rrIL-4） 4ng/ml+Dox 100ng/ml、500ng/ml和1000ng/ml诱导8天，同时设立rrGM—CSF 4ng/ml+rrIL-4 4ng/ml为对照组。于倒置显微镜下观察Dox对RBM-DCs形态学变化的影响，同时采用流式细胞仪分析RBM-DCs表面标志的变化，最后用同种异体混合淋巴反应检测Dox对RBM-DCs刺激同种异体T淋巴细胞增殖的调节作用。结果倒置显微镜下形态学观察表明，实验组与对照组之间无明显差别；流式细胞术分析证实：不同剂量的Dox均可下调RBM-DCs表面CD11c、OX62、MHC-Ⅱ、CD86和CD80分子的表达；经Dox处理的RBM-DCs刺激T淋巴细胞增殖的能力下降。结论Dox可能通过下调RBM-DCs表面分子CD11c、OX62、MHC-Ⅱ、CD86和CD80分子的表达抑制RBM-DCs的成熟及分化，从而下调抗原递呈功能。目的探讨肾上腺素能β2受体激动剂沙丁胺醇（Salbutamol，Sal）对RBM-DCs表型及功能的影响。方法无菌分离SD大鼠骨髓细胞，经rrGM-CSF 4ng／ml+rrIL-4 4ng／ml+Sal 250ng／ml、β2受体拮抗剂丁氧胺（butoxamine，But）300ng／ml、Sal250ng／ml+But 300ng／ml诱导8天，同时设立rrGM-CSF 4ng／ml+rrIL-44ng／ml为对照组。于倒置显微镜下观察Sal对RBM-DCs形态学变化的影响，采用流式细胞仪分析RBM-DCs表面标志的变化，用同种异体混合淋巴反应检测Sal对RBM-DCs刺激同种异体T淋巴细胞增殖的调节作用。结果显微镜下细胞形态学观察未发现实验组与对照组之间有明显差别；流式细胞术分析表明：Sal 250ng／ml上调RBM-DCs表面0X62的表达，但下调CD80、CD86和MHC-Ⅱ类分子，对CD11C却无明显影响；But 300ng／ml可下调CD11C、MHC-Ⅱ、CD80和CD86的表达，对0X62的表达无明显影响；Sal250ng／ml+But 300ng／ml明显下调CD80和CD86、MHC-Ⅱ、CD11C的表达，上调0X62的表达；Sal 250ng／ml可以抑制RBM-DCs刺激T细胞增殖能力；But300ng／ml也可以抑制RBM-DCs刺激T细胞增殖能力；Sal 250ng／ml+But300ng／ml共同应用也可以抑制RBM-DCs刺激T细胞增殖能力，未见But能有效拮抗Sal的效应。结论Sal具有抑制RBM-DCs表面MHC-Ⅱ和共刺激分子表达，下调免疫递呈功能，但能促使造血干细胞向RBM-DCs分化；But对RBM-DCs抗原递呈功能的影响类似于Sal的作用；But与Sal共同应用未见明显阻断或叠加作用。因此，Sal和But可能通过β2受体以外的信号途径调节RBM-DCs免疫功能，但需要进一步研究证实。