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给予卡介苗(BCG)预处理的小鼠低剂量的细菌脂多糖(LPS)引起小鼠急性肝脏损伤,表现为肝脏大量巨噬细胞浸润,伴有高水平的肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生;氨基半乳糖(GalN)和LPS共处理可诱导TNF-α介导的、以肝脏细胞凋亡为主要特征的急性肝损伤。核因子κB(NF-κB)激活在两种TNF-α介导的急性肝损伤过程中均起重要作用,但发挥的效应可能不同。二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)是NF-κB活性抑制剂。本研究通过观察PDTC对LPS诱导小鼠两种急性肝损伤的不同效应,以阐明NF-κB激活在这两种肝损伤中的作用。为探讨PDTC对给予BCG预处理的小鼠低剂量的LPS引起的急性肝损伤的效应,本实验设置对照组、LPS组、BCG组、BCG/LPS组、PDTC+BCG/LPS组和PDTC组。除对照组和LPS组外,各组小鼠经尾静脉注射BCG(2.5 mg/0.2 mL/只),10 d后,BCG/LPS组给予LPS(0.2 mg/kg,ip),PDTC+BCG/LPS组于LPS(0.2 mg/kg,ip)前24 h和2 h分别给予PDTC(100+100 mg/kg,ip),LPS组单纯给予LPS(0.2 mg/kg,ip),PDTC组单纯给予小鼠PDTC(100+100 mg/kg,ip),BCG组和对照组给予等体积生理盐水(saline)。每组15只小鼠被用于观察LPS处理后72 h内的动物死亡情况;每组6只小鼠于LPS处理后1.5 h被取血、处死和留取肝脏,用RT-PCR检测肝脏组织TNF-α、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6 mRNA表达水平,用EMSA分析肝脏NF-κB结合活性,用ELISA测定血清TNF-α含量;每组12只小鼠于LPS处理后6 h取血、处死和留取肝脏,测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)活力、一氧化氮(NO)水平和肝组织还原型谷胱甘肽(GSH)含量,并对肝组织切片行常规HE染色。结果发现,给予BCG预处理的小鼠低剂量的LPS引起40%小鼠死亡,显著升高血清ALT活力并伴有肝脏坏死和大量的炎性细胞浸润;BCG/LPS处理激活肝脏NF-κB结合活性,上调肝脏TNF-α表达,降低肝脏GSH水平和升高NO生成;PDTC明显抑制肝脏NF-κB活性并下调肝脏TNF-α表达,升高肝脏GSH含量和降低NO生成;PDTC预处理显著降低BCG/LPS模型组血清ALT活力,减轻BCG/LPS引起的肝脏炎症和坏死并降低小鼠死亡率。为研究PDTC对GalN/LPS诱导小鼠急性肝损伤的效应,本实验设置对照组、LPS组、GalN组、GalN/LPS组、PDTC+GalN/LPS组和PDTC组。GalN/LPS组同时给予小鼠LPS(20μg/kg,ip)和GalN(600 mg/kg,ip),PDTC+GalN/LPS组小鼠于LPS(20μg/kg,ip)和GalN(600 mg/kg,ip)共处理前24 h和2 h分别经腹腔注射PDTC(100+100 mg/kg),LPS组、GalN组和PDTC组分别单纯给予小鼠LPS(20μg/kg,ip)、GalN(600 mg/kg,ip)或PDTC(100+100 mg/kg),对照组给予等容积生理盐水。每组10只小鼠被用于观察LPS处理后72 h内的动物死亡情况;每组6只小鼠于LPS处理后1.5 h被取血、处死并留取肝脏,用RT-PCR检测肝脏组织TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达水平,用EMSA分析肝脏NF-κB活性,用ELISA法测定血清TNF-α含量;每组12只小鼠于LPS处理后6 h取血、处死并留取肝脏,测定血清ALT活力、NO水平和肝组织GSH含量,用比色法检测肝脏caspase-3活性,用TUNEL技术和DNA断裂分析方法检测肝脏细胞凋亡,并对肝组织切片行常规HE染色。结果显示,GalN/LPS共处理引起90%小鼠死亡,显著升高血清ALT活力和肝脏caspase-3活性,诱导肝脏细胞凋亡和炎性细胞浸润;GalN/LPS共处理引起肝脏GSH损耗和NO生成;PDTC预处理抑制GalN/LPS引起的肝脏TNF-α表达、升高肝脏GSH水平并降低NO生成,但PDTC反而加重GalN/LPS引起的肝脏细胞凋亡、进一步升高血清ALT活力、加重肝脏充血和坏死以及加速小鼠死亡。上述研究结果提示,PDTC对LPS诱导的两种急性肝损伤有不同效应。一方面,PDTC预处理可能通过抑制肝脏Kupffer细胞NF-κB介导的TNF-α释放,保护BCG/LPS诱导的急性肝损伤;另一方面,PDTC预处理则可能通过抑制肝脏实质细胞NF-κB介导的抗凋亡机制,加重GalN/LPS诱导的急性肝损伤。