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背景及目的恶性淋巴瘤是一类高度异质性肿瘤，尤其是非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma，NHL)，其分类演变在肿瘤分类中最为复杂。淋巴瘤的WHO新分类定义需结合形态学、免疫表型、临床特征以及遗传学(某些病例)来确定分化类型，因此免疫表型在淋巴瘤诊断中占有重要地位。流式细胞术(flow cytometry，FCM)是一种单细胞定量分析和分选的新技术，运用流式细胞术分析淋巴瘤免疫表型和传统的免疫组化技术相比，有快速、敏感及多参数分析等优点。细针穿刺细胞学(fine-needle aspiration cytology，FNC)是一种简便、快速并较为准确的新的肿瘤诊断方法，但FNC在淋巴瘤诊断中的作用一直备受争议，以前仅将它作为对淋巴瘤的初步诊断，但联合免疫表型和遗传学特征的检测可提高淋巴瘤诊断的准确性。FCM和FNC结合后，更能相互取长补短，提高淋巴瘤诊断及分型的特异性和敏感性。国外文献报道FCM／FNC在NHL诊断和分型方面有较高敏感性及特异性，而国内用此方法对NHL诊断和分型的研究及应用甚少。因此，本实验运用FCM分析浅表淋巴结细针穿刺小标本的免疫表型，结合细胞学形态做出诊断，并与淋巴结活检后的组织学诊断进行比较，判断FCM／FNC诊断和组织学诊断之间的符合率，初步探讨这种方法在NHL诊断和分型方面的作用和局限性。材料和方法对郑州大学第一附属医院病理科2006年5月至2007年3月期间因浅表淋巴结肿大患者行细针穿刺细胞学检查，39例细胞学涂片提示为NHL和良性反应性增生(benign reactive hyperplasia，BRH)的病例，同一部位淋巴结再次行细针穿刺，获取的标本用于FCM分析。所用标记的单克隆抗体包括CD19、κ／λ、CD5、CD10、CD23、CD3、CD2和CD7。结合细胞学形态及FCM免疫表型结果做出诊断及分型，并与淋巴结活检后的组织学诊断对比分析，判断FCM／FNC诊断与组织学诊断之间的符合率，探讨这种方法在NHL诊断和分型方面的作用和局限性。结果1．39例浅表淋巴结肿大患者的细针穿刺细胞学涂片提示为NHL或BRH。这39例经FCM／FNC诊断，其中NHL21例，BRH13例，疑似NHL5例。21例NHL中，B-NHL14例，T-NHL7例。14例B-NHL中，13例(92.86％)为轻链限制性表达，11例(78.57％)可以准确区分亚型，包括3例B-小淋巴细胞淋巴瘤，3例滤泡性淋巴瘤和5例弥漫大B细胞淋巴瘤。另外3例B-NHL未能分型。7例T-NHL中，FCM分析有6例T细胞抗原表达缺失，未能进一步分型。2．这39例浅表淋巴结肿大病例后经组织学诊断，其中NHL 26例，BRH 12例，组织细胞性坏死性淋巴结炎1例。26例NHL中，B-NHL 16例和T-NHL 10例。16例B-NHL中，B-小淋巴细胞淋巴瘤3例，套细胞淋巴瘤1例，滤泡性淋巴瘤4例，弥漫大B细胞淋巴瘤8例。10例T-NHL中，外周T细胞淋巴瘤6例，T淋巴母细胞性淋巴瘤2例，间变性大细胞淋巴瘤2例。3．39例标本的FCM／FNC诊断与组织学诊断结果的符合率为84.62％(33／39)，其中NHL的诊断符合率为80.77％(21／26)，BRH的诊断符合率为100％(12／12)。NHL中，B-NHL的诊断符合率为87.50％(14／16)，16例中T-NHL的诊断符合率为70.00％(7／10)。结论1．B-NHL的主要免疫学特征是免疫球蛋白轻链限制性表达。FCM／FNC在诊断B-NHL方面有较强特异性和敏感性，并可以对大多数B-NHL准确区分亚型。2．FCM／FNC诊断T-NHL比B-NHL更为困难。FCM检测到一个或多个T细胞抗原表达缺失是诊断T-NHL最有价值的指标之一。3．多克隆表型结合细胞学特征可以较肯定诊断为良性反应性增生，但是淋巴结显著增大或临床指征怀疑为淋巴瘤的病例需要活检证实。4．对瘤细胞数较少并夹杂较多反应性细胞的NHL，FCM／FNC的应用价值不大，例如富于T细胞性大B细胞淋巴瘤和一些淋巴瘤结内病变为非弥漫性改变的病例等。