猪源发酵乳杆菌的分离筛选、特性及应用研究

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本研究旨在利用传统鉴定法和分子生物学手段鉴定分离菌株的菌种属性,并对其耐受人工胃肠液能力、抑菌性和黏附作用等特性进行研究。将分离的乳酸菌制成冻干粉添加到保育猪日粮中,选用(35±2)日龄的健康保育猪160头,分为4组,试验期35d。取得如下结果:1)利用乳酸菌传统鉴定法和16S rRNA基因序列分析法筛选出一株菌,并送至中国科学院微生物研究所进行鉴定。2)该菌在接种量为1%、初始pH为5.3,37℃培养10~36h时生长状态最佳。该菌在pH3.0的人工胃液中培养2h和4h,存活率分别为97.92%和86.46%;在人工肠液中培养2h和4h,存活率分别84.68%和75.68%。该菌在50℃、55℃、60℃处理2min时,存活率分别为99.19%、91.94%、80.65%。该菌在菌液浓度为109CFU/mL时,黏附Caco-2细胞的数量最多,能够达到940CFU/100cells。3)冻干保护剂优化结果显示,该菌的最佳保护剂配比为2%脱脂乳、1.5%谷氨酸钠、0.25%半胱氨酸、2%海藻糖、1%乳糖、1%蔗糖和1%糊精,冻干存活率最高。4)动物试验表明,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组粪中乳酸菌的含量比对照组分别提高了0.34%(P>0.05)、4.30%(P<0.05)、1.13%(P>0.05);试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组粪中金黄色葡萄球菌的含量比对照组分别降低了0.51%(P>0.05)、9.80%(P<0.05)、4.22%(P>0.05)。
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