【摘 要】
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薄荷醇是全球三大香料化学品之一。理论上有8种立体异构体,但只有L-薄荷醇具有味香和清凉作用,具有较大的商业应用价值,广泛应用于食品、药品、化妆品、茶类和烟草产品等众多
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薄荷醇是全球三大香料化学品之一。理论上有8种立体异构体,但只有L-薄荷醇具有味香和清凉作用,具有较大的商业应用价值,广泛应用于食品、药品、化妆品、茶类和烟草产品等众多领域。本文研究了疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶的固定化及其在非水相体系中催化拆分DL-薄荷醇的应用。利用苯乙烯型非极性共聚体D101作为疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶的固定化载体,优化了固定化工艺:30℃水浴,载体与脂肪酶按1 g:2.5 mL加入,添加2%海藻糖,振荡速率150 rpm,固定反应8 h。制备的固定化酶重复批次和贮藏稳定性较好。建立了固定化脂肪酶非水有机相中不对称拆分DL-薄荷醇的反应体系,优化后的反应条件如下:反应溶剂为甲基叔丁基醚,乙酸乙烯酯为酰基供体,摩尔比(乙酸乙烯酯:DL-薄荷醇)3.8:1、酶浓度20g/L,4?分子筛0.12 g,转速150 rpm,反应温度40℃。当底物浓度为65 mM时,最适条件下反应24 h,转化率为41.23%,产物L-乙酸薄荷酯的对映体过量值(e.e.p)99%以上。自行设计一套填充床反应器用于DL-薄荷醇手性拆分的连续化生产,考察了反应液流速、底物浓度、反应滞留时间等因素对连续式酶催化反应的影响。实验得出较优的填充床酶反应器反应结果:0.01mL/min的流速条件,底物浓度为5%时,转化率达43.46%,产物e.e.p达99.25%,连续反应22批次,该酶柱仍保持89.5%的相对酶活力。为了降低固定化酶成本,筛选获得可用于手性拆分DL-薄荷醇的活性较高的产酶菌株,并对产酶条件进行了优化。通过初筛和复筛,得到催化反应速率最快和拆分效果最好的菌株米曲霉WZ007。优化了产酶条件,得出优化后的条件为:1.6%乳糖,1.2%酵母膏,2 mM Fe3+,初始发酵pH 7.0,发酵24 h,酶活力达到65 U/g。该菌株在MTBE有机相反应体系中保持着良好的操作稳定性,在DL-薄荷醇的拆分方面具有应用前景。
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