屋尘螨特异性免疫治疗抑制IgE易化变应原结合的检测方法的建立和验证

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特异性免疫治疗用于治疗变应性鼻炎已在很多地方得以开展,并获得良好的临床效果。特异性免疫治疗可诱导机体发生一系列免疫学改变,包括抗体反应和细胞反应,其中血清特异性IgG4被认为是特异性免疫治疗诱导产生的抑制性―封闭抗体‖的主要成分。但是,任何单一的免疫学产物表达水平的检测都不能令人信服地解释特异性免疫治疗所带来的临床改善,亟需找到一种综合反映特异性免疫治疗诱导的血清抗体抑制功能的生物学标记。IgE易化变应原提呈(IgE-facilitated allergen presentation, FAP)涉及到变态反应发生的多个环节和方面,而特异性免疫治疗能够抑制这一过程。其体外实验可以简化为IgE易化变应原结合(IgE-facilitated allergen binding, FAB)实验,后者可被一种基于流式细胞术的简单方法检测到。变应原与含高浓度特异性IgE的血清共同孵育,形成变应原-IgE复合物,再经Fc段与EB病毒转化的B细胞的表面IgE低亲和力受体结合后,即可被流式细胞术检测到。加入特异性免疫治疗后血清,变应原-IgE复合物的形成及其后与B细胞的结合受到抑制,在流式细胞术中则表现为结合有复合物的B细胞百分率下降,即特异性免疫后血清治疗可以抑制FAB,而且,这种抑制程度与特异性免疫治疗所导致的临床改善程度直接相关,使得特异性免疫治疗后血清对FAB的抑制活性成为提示特异性免疫治疗临床疗效的良好生物标记。本研究严格按照International Conference on Harmonisation (ICH)的实验方法学建立指南,对屋尘螨特异性免疫治疗抑制IgE易化变应原结合的检测方法进行了标准化和临床应用验证。分析发现该检测方法有着较小的批内和批间变异,重复性好,同时有着良好的敏感度、线性度和稳健性,临床敏感性和特异性高,是一种监测特异性免疫血清抑制活性的良好生物学标记,对提示特异性免疫性治疗效果有着重要指导意义。
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