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目的:研究应用平衡型核苷转运载体(hENTS)的阻断剂阻断hENTS后,对氟尿嘧啶(5-Fluorouraci, 5-FU)细胞毒性的影响及其机制。方法:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测三种胰腺癌细胞株Panc-1,Sw1990和Aspc-1中hENT1、hENT2、hCNT1、hCNT2、hCNT3的mRNA表达。三种细胞株接种于96孔板后,被分为hENTS阻断组和hENTS未阻断组进行MTT实验,其中hENTS阻断组根据阻断剂DP浓度进一步分为两个亚组,即DP浓度为5μM和10μM组,各组细胞分别在含有一定浓度序列5-FU的培养液中培养48 h。MTT法检测3种细胞株每组的增殖情况,并计算各组5-FU的IC50。为研究DP联合5-FU对Panc-1细胞凋亡和细胞周期的影响,Panc-1细胞根据DP浓度也被分成3组进行实验。各组细胞分别在含有5-FU的培养液中培养24 h,其中5-FU的浓度为MTT实验中hENTS未阻断组Panc-1细胞IC50的2倍。流式细胞仪检测细胞的凋亡率和周期改变。结果: MTT结果显示5-FU抑制了3种细胞株的增殖。DP阻断hENTS后,在Panc-1和Sw1990细胞,能明显增强5-FU的作用,而在Aspc-1中则不能增强5-FU的作用。这种差别与细胞表达hENTS的不同有关,在Panc-1和Sw1990细胞中,hENTS高表达,而在Aspc-1中则hENT1表达较低,hENT2无表达。与未阻断组比较,DP 10μM阻断组中5-FU的IC50在Panc-1细胞降低了7倍(P < 0.01),在Sw1990细胞降低了10倍(P < 0.01),在Aspc-1细胞没有改变。流式细胞仪检测凋亡和周期结果发现,5-FU能引起Panc-1细胞凋亡和周期的改变,而DP阻断hENTS后,增强了5-FU诱导Panc-1细胞凋亡和干扰细胞S期合成DNA的作用,其中DP 10μM组细胞凋亡率是hENTS未阻断组的1.80倍(P < 0.01),S期的细胞比例是hENTS未阻断组的74.06 % (P < 0.05)。结论:在胰腺癌细胞株中,DP阻断细胞膜上hENTS后,能显著增强5-FU的毒性作用,这种增强作用需要有胰腺癌细胞hENT1和hENT2高表达。