可逆乙酰化对酵母ssa4基因转录调控的分子机制研究

来源 :东北师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ananluo2009
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真核生物与原核生物基因组结构的最大差别是真核生物的基因组紧密压缩和包装在染色质结构中。染色质的高级结构是真核生物基因转录进行的障碍,为了使基因转录正常进行,核心组蛋白的结构必须发生改变。近年来人们发现了能够通过改变染色质构型来影响(活化或抑制)基因转录的蛋白质复合物,统称为核小体重塑复合物(nucleosome remodeling complexes)。Gcn5(general control non-derepressible 5)是SAGA这种在酵母中主要的转录相关HAT复合物的接触反应亚基,主要的作用靶位为组蛋白H3,通过乙酰化修饰发挥重要作用。我们选取hsp70家族ssa4基因,通过Real-time RT-PCR,染色质免疫沉淀,免疫共沉淀,RT-PCR等实验技术进行分析证明组蛋白乙酰转移酶Gcn5可以结合到ssa4基因的启动子区,通过调控启动子区组蛋白H3的乙酰化水平,对基因的转录调控发挥作用。并且我们发现,HDAC也参与了ssa4基因的转录调控,在TSA处理的野生型菌株和组蛋白去乙酰化酶缺失突变菌株中检测ssa4基因的表达情况,证明酵母中组蛋白去乙酰化酶Rpd3对ssa4基因的表达具有明显的调控作用。总之,可逆的组蛋白乙酰化修饰对ssa4基因的转录调控具有十分重要的作用。组蛋白乙酰转移酶Gcn5直接参与了ssa4基因的转录调控,它与组蛋白去乙酰化酶的拮抗作用决定了ssa4基因的转录状态。本论文对热休克基因ssa4转录调控的研究,为进一步深入探讨其转录机理提供了有价值的实验证据。
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