广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A的分离纯化、性质研究及基因克隆

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通过Sephadex G-75凝胶柱过滤,CM-Sepharose CL-6B和DEAD-Sephadex A-50离子交换住层析,从广西眼镜王蛇毒分离到一种电泳纯的酸性磷脂酶A<,2>,命名为APLA<,2>-1.为了得到APLA<,2>蛋白质全序列,该研究还利用基历克降的方法测定了APLA<,2>-1的cDNA序列,从而推导出蛋白质序列APLA<,2>-1的cDNA包含一个453 bp的完整的读码框架,编码27个氨基酸的信号伏和124个氨基酸的成熟肽,具有典型的APLA<,2>序列特征,它的成熟肽N端的1~15位氨基酸残基序列分析软件包预测了它的二级结构和部分理化性质,蛋白质序列同源性分析表明,它与福建眼镜王蛇和台湾眼镜王蛇毒APLA<,2>具有极高的同源性,而与部分皮肤镜蛇毒APLA<,2>财源性相对较低.APLA<,2>-1的分离纯化、性质研究和基因克隆,为其进一步进行晶体结构研究,基因定点突变,进而探讨蛇毒活性蛋白结构与功能关系及APLA<,2>生物进行创造了良好的条件.
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