长链非编码RNA00704在肾透明细胞癌中的表达和生物学功能研究

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目的:了解长链非编码RNA-00704在肾透明细胞癌癌旁组织和癌组织中的相对表达情况,同时进一步掌握其在肾透明细胞癌中的异常表达对患者预后的影响和其对肿瘤生物学行为的影响。方法:在TCGA数据库中,我们检索并收集了肾癌的数据集后做初步预处理,随后用graphpad prism软件对数据进行分析,包括lnc RNA在肾透明细胞癌组织和正常癌旁组织表达有无差异和Lnc RNA-00704的表达情况与肾透明细胞癌临床及病理相关指标的关系,并用log-rank方法分析Lnc RNA-00704的表达情况与患者的总生存期及无进展生存期之间的关系,绘制Kaplan-meier生存曲线表示。收集40对肾透明细胞癌的临床组织样本,用qrt-PCR技术检测其在肾透明细胞癌和癌旁组织中的相对表达情况,和收集的数据进行对比验证;培养四种肾透明细胞癌细胞系786-O,ACHN,OS-RC-2,A498及正常肾小管上皮细胞HK-2,同样的方法检测检测其相对表达水平,进一步验证数据库中的数据分析结果;构建出sh RNA载体,沉默Lnc RNA-00704的表达基因,对比沉默前后肾透明细胞癌细胞系ACHN,786-O的增殖、迁移及侵袭能力,了解Lnc RNA-00704对肿瘤生物学行为的影响。结果:1.lnc RNA-00704在cc RCC中相对高表达;Lnc RNA的表达水平与年龄、复发无相关性,与患者性别、cc RCC的病理分级、TNM分期和转移具有明显的相关性;lnc RNA-00704高表达组患者的预后劣于低表达组。2.沉默Lnc RNA-00704后,细胞功能学实验显示肾透明细胞癌(786-0、ACHN)的增殖、迁移及侵袭能力受到了显著抑制。结论:1、lnc RNA-00704在肾透明细胞癌组织中相对高表达,并且其在肾透明细胞癌中的相对高表达与患者的年龄、性别和复发无关,但是与患者TMN分级、病理分期相关和转移相关,并且,其在肿瘤中的相对高表达与患者的预后呈明显的负相关,这提示lnc RNA-00704可能是肾透明细胞癌发生、发展的一个促进因素。2、当lnc RNA-00704的表达被沉默以后,肾透明细胞癌的增殖、迁移和侵袭能力受到了明显的抑制,这提示lnc RNA或许可以作为肾透明细胞癌靶向治疗的一个靶点,为肿瘤治疗新方案的探索提供依据。
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