肾母细胞瘤动脉栓塞化疗及机理的研究

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肾母细胞瘤为儿童最常见的恶性实体瘤之一,占小儿肾脏肿瘤第一位,3岁以前是发病的高峰期。该肿瘤早期症状不明显,但发展迅速,就诊时常肿瘤已巨大,难以完整切除,预后较差。随着以手术、化疗、放疗等综合治疗的应用,使肾母细胞瘤的总体治愈率已明显提高。其中,术前化疗在中晚期肾母细胞瘤治疗中的作用已得到公认。术前介入治疗(动脉栓塞化疗Transcatherter arterial chemo-embolization,TACE)在肝肿瘤治疗中的应用大大提高了肿瘤的完整切除率和生存率。但在肾母细胞瘤治疗中的应用尚少。肾动脉是肾母细胞瘤的主要供血血管,血流丰富,适于进行经动脉的化疗栓塞,而且化疗栓塞前的肾动脉造影还有助于与肾外肿瘤的鉴别诊断。因此本院在国内首先将TACE应用于肾母细胞瘤的治疗,在数字减影X线下(DSA)将化疗药与栓塞剂(碘化油)混合后经导管直接注入瘤肾供养血管,栓塞肿瘤血管。碘油长期滞留在瘤肾内,肿瘤血流明显减少。化疗药长时间局限在瘤肾内缓慢释放,剂量小而局部浓度高,能更好发挥2004年浙江大学硕士论文肿瘤细胞杀灭作用而全身毒副作用较小。增殖细胞核抗原(PCNA)存在于细胞核内。静止期细胞内含量极少,增殖细胞或转化细胞中表达量高,在G!晚期及S期表达量最高,M期末降解消失,是研究细胞增殖活性的重要指标。PCNA的表达在肿瘤的发生发展中具有重要作用。肿瘤的生长、肿瘤的转移及转移部位的生长均有赖于肿瘤组织新生血管的生成,目前己知血管内皮生长因子(VEGF)是参与血管生成的最重要的一种生长因子。它特异作用于血管内皮细胞,促进内皮细胞的有丝分裂和趋化作用,还增加血管通透性,使管内的纤维蛋白原等外渗,不仅为内皮细胞迁移和新生毛细血管网的建立提供必要的基质,也为肿瘤的生长提供良好的基质。本研究旨在对肾母细胞瘤术前动脉栓塞化疗的方法、疗效、患儿的耐受程度、毒副反应和作用机理包括肿瘤细胞退变情况、肿瘤细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的改变等进行研究。进一步提高肾母细胞瘤,尤其是晚期肾母细胞瘤的疗效。材料与方法.病例与分组:肾母细胞瘤41例。住院后经腹部B超、CT和/或静脉肾盂造影初步诊断为肾母细胞瘤。分为两组:①TACE组:23例,行术前动脉栓塞化疗,2周左右再行肿瘤切除术;②对照组:18例,未应用术前动脉栓塞化疗而直接手术切除肿瘤。2004年浙江大学硕士论文组织分型按照国际小)匕肿瘤学会(SIOP)和美国Wilms,瘤研究组(NWTS一3)的分型法分为“预后好的组织结构(FH)”和“预后差的组织结构(UH)”。分期根据NWTS一3的标准。术前临床分期:TACE组23例包括I期6例、n期O例、m期9例、W期1例、因肿瘤巨大难以分期7例,其中15例手术前进行细针肿瘤穿刺活检,13例为良好组织学类型(FH),1例不良组织学类型(UH),1例为小片脂肪、血管组织。对照组18例中包括I期8例、11期2例、111期3例、因肿瘤巨大难以分期5例,均未作穿刺活检所有病例均经手术标本组织学检查证实为肾母细胞瘤。所有病例均经手术切除标本组织学检查证实为肾母细胞瘤。2.术前介入治疗(肾动脉栓塞化疗)方法:利用数字减影血管造影(DsA)设备,采用seldinger技术,腹股沟部经皮穿刺股动脉,插入猪尾巴导管作腹主动脉造影显示腹主动脉并了解双侧肾动脉走向。然后以5一6F肾动脉导管(Cobra管)插入肾动脉。注入造影剂证实已进入肾动脉。了解肿瘤的位置、大小、浸润的范围。经肾动脉造影证实为肾肿瘤后行栓塞化疗。栓塞乳剂配方为:40%碘化油(或超液碘油)0.sml/kg,阿霉素或表阿霉素20mg/m(体表面积),生理盐水5一10ml,必要时(w期)可加入顺铂50mg/mZ(体表面积)。用注射器将上述药物反复抽吸混成乳剂,缓慢(每分钟lml)注入瘤肾动脉,透视下见栓塞剂分布至整个肿瘤,将小条明胶海绵与生理盐水一起注入栓塞肾动脉主干。拔除导管后穿刺部位压迫止血,观察有无穿刺部位出血、穿刺侧下肢血液循环和足背动脉搏动。手术时间平均92分钟。2004年浙江大学硕士论文3.临床观察和随访:观察TACE后患儿的临床变化包括临床表现、全身情况、白细胞计数、肝肾功能、心电图,B超比较TACE前后肿瘤大小的变化。B超下肿瘤体积计算方法:V(ml)=0.523 x L x w xH(L、w、H分别为高、宽、厚的最大值)。以TACE前后肿瘤体积之差除TACE前的体积的百分比为缩小的比例。比较两组肿瘤完整切除率及2年无瘤生存率。4.组织学及免疫组化检查:栓塞化疗后2一3周手术切除瘤肾。肾母细胞瘤外科手术标本中性缓冲福尔马林固定,常规取材、脱水、透明、浸蜡、包埋、连续切片4um3张,分别进行HE染色行肿瘤细胞退变程度检查及PCNA、VEGF免疫组化染色并检查其表达强度。免疫组化采用PowerVISion”Two一Step试剂盒(MaXim公司),pCNA、vEGF一抗均为Antibody oiagnostiCa Inc产品,严格按照说明书操作,设立阳性、阴性对照,结果分析采用HP工AS一1000高清晰度病理彩色图文分析管理系统。①肿瘤细胞退变程度的组织学检查,HE染色观察肿瘤细胞形态:按Tepper
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