生脉饮、失笑散对阿霉素心脏毒性模型大鼠心肌能量代谢影响的对比研究

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目的通过生脉饮、失笑散两种中医经典方药对阿霉素心脏毒性模型大鼠心肌能量代谢影响的异同,比较研究益气养阴法与活血化瘀法两种中医治法组成的方药对心肌能量代谢的影响及作用机制。方法雄性SD大鼠108只,随机分为正常组、模型组、曲美他嗪组、生脉饮高剂量组、生脉饮低剂量组、失笑散组,18只/组。腹腔注射阿霉素2.5mg/kg,1次/周,共6次,累积量达15mg/kg,建立阿霉素心脏毒性模型。正常组腹腔注射等量生理盐水,时程同模型建立方法。模型建立成功后,各药物组予相应药物灌胃(曲美他嗪组、生脉饮低剂量组、失笑散组均为临床等效剂量,生脉饮高剂量组为临床等效剂量4倍),1次/日,正常组予等量生理盐水。14天后,各组处死一半数量大鼠并取材,剩余继续给药,28天后余下大鼠取材。检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA);过氧化体增殖物激活型受体a (PPARa) mRNA表达;凋亡家族Bcl-2与Bax蛋白表达。结果(1)ELISA法结果显示:灌胃14天,模型组SOD水平明显低于其余各组(P<0.05);与模型组比较,各药物组均可明显提高SOD水平(P<0.05),曲美他嗪最为显著;生脉饮高剂量组优于低剂量组(P<0.05);生脉饮低剂量组优于失笑散组(P<0.05)。灌胃28天,各药物组与模型组比较均有显著性差异(P<0.05);生脉饮高剂量组与曲美他嗪组无明显差异(P>0.05);生脉饮低剂量组效优于失笑散组(P<0.05);28天组与14天组比较,模型组SOD水平明显降低(P<0.05);各药物组提高SOD水平28天组均效优于14天组(P<0.05)。灌胃14天,模型组MDA水平明显高于其余各组(P<0.05);与模型组比较,各药物组均可降低MDA水平(P<0.05),曲美他嗪效果最明显;生脉饮高剂量组优于其余中药组(P<0.05);生脉饮低剂量组优于失笑散组(P<0.05)。灌胃28天,曲美他嗪降低MDA水平优于生脉饮高剂量组(P<0.05);生脉饮高剂量组优于低剂量组(P<0.05);生脉饮低剂量组与失笑散作用无明显差异(P>0.05)。28天组与14天组比较,模型组MDA显著升高(P<0.05);各药物组灌胃28天效均优于14天(P<0.05)。(2)RT-PCR结果显示:灌胃14天,模型组PPARa mRNA表达明显低于余组(P<0.05);生脉饮高剂量组可显著提高PPARa mRNA表达,但作用不及曲美他嗪(P<0.05);生脉饮低剂量组优于失笑散组(P<0.05)。灌胃28天,与模型组比较,各药物组均明显提高PPARa mRNA表达(P<0.05);生脉饮高剂量组与曲美他嗪组比较无明显差异(P>0.05);生脉饮高剂量组优于低剂量组(P<0.05);生脉低剂量组饮与失笑散组无显著性差异(P>0.05);28天组与14天组比较,模型组PPARa mRNA表达明显降低(P<0.05);各药物组灌胃28天效果均明显优于14天(P<0.05)。(3)免疫组化结果显示:灌胃14天,与正常组相比,模型组Bax表达明显升高(P<0.05),Bcl-2表达无明显差异(P>0.05);与模型组相比,各药物组均明显降低Bax表达(P<0.05),提高Bcl-2表达(P<0.05),曲美他嗪最为显著;生脉饮高剂量组优于低剂量组(P<0.05);生脉饮低剂量组优于失笑散组(P<0.05);曲美他嗪提升Bcl-2/Bax两者比值最为显著,生脉饮高剂量组优于低剂量组(P<0.05);生脉饮低剂量组优于失笑散组(P<0.05)。灌胃28天,与正常组相比,模型组Bax表达明显升高(P<0.05),Bcl-2表达无明显差异(P>0.05);与模型组比较,各药物组均明显降低Bax表达(P<0.05),上调Bcl-2表达(P<0.05),曲美他嗪最为显著;生脉饮高剂量组优于低剂量组(P<0.05);生脉饮低剂量组优于失笑散组(P<0.05);在提升Bcl-2/Bax两者比值上,曲美他嗪优于生脉饮高剂量组(P<0.05);生脉饮高剂量组优于低剂量组(P<0.05);生脉饮低剂量组效优于失笑散组(P<0.05);28天组与14天组相比,正常组无明显差异(P>0.05);模型组Bax表达明显升高(P<0.05),Bcl-2无明显变化(P>0.05);各药物组在降低Bax及提高Bcl-2表达水平上,灌胃28天优于灌胃14天(P<0.05)。结论:1.生脉饮、失笑散均可通过提高大鼠血清SOD、降低MDA,减轻氧化应激损伤;生脉饮抗脂质过氧化作用优于失笑散2.生脉饮、失笑散均可提高心肌PPARa mRNA表达,介导脂质代谢过程改善心肌能量代谢障碍,且随着给药时间的延长作用更明显;3.生脉饮、失笑散可降低Bax蛋白表达、升高Bcl-2蛋白表达,提高Bcl-2/Bax两者比值抑制细胞凋亡,生脉饮优于失笑散;4.生脉饮、失笑散均可对阿霉素心脏毒性心肌能量代谢障碍产生保护作用,生脉饮高剂量优于生脉饮低剂量,存在一定的量效关系,给药28天效优于14天,益气养阴的生脉饮优于活血化瘀的失笑散。
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