桑提取物对酪氨酸酶的抑制作用研究

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在人和动植物体内,黑色素的生物合成都是发生在含有酪氨酸酶的一系列黑色素细胞中。酪氨酸酶是黑色素生物合成中必不可少的关键酶,黑色素细胞中的酪氨酸在酪氨酸酶的催化下最终形成黑色素。因此寻找高效的酪氨酸酶抑制剂已成为化妆品行业关注的热点。本文主要以桑类植物提取物对酪氨酸酶的抑制作用为评价指标,追踪和分离桑类植物中最有效的酪氨酸酶抑制剂。以桑叶和桑白皮为提取对象,比较提取产物对酪氨酸酶的抑制作用,筛选最佳的抑制酪氨酸酶的活性部位。结果表明桑白皮提取物对酪氨酸酶的抑制效果普遍要比桑叶提取物好,确定桑白皮作为最佳活性部位。在此基础上,考察不同极性的提取溶剂对提取物抑制酪氨酸酶活性的影响,通过对抑制率和提取产率两个指标综合考虑,确定乙醇为最佳提取溶剂。以乙醇提取物对酪氨酸酶的抑制率和提取产率为评价指标,考察桑白皮提取工艺对提取物抑制酪氨酸酶活性的影响。分别探讨了提取溶剂乙醇的浓度、提取时间、提取温度和pH对浸膏得率和抑制率的影响,在此基础上设计了4因素3水平的正交实验,实验结果经过方差分析,表明影响酪氨酸酶抑制率的主要因素是提取温度,而影响产率的主要因素是乙醇的浓度。正交实验得到桑白皮酪氨酸酶抑制剂的最佳提取工艺:桑白皮用浓度为55%的乙醇在60℃回流提取2次,每次2小时,pH值为6.8。以此提取工艺重复提取,提取物对酪氨酸酶的平均抑制率为72.92%,平均得率为27.90%。采用层析分离的方法,对桑白皮中抑制酪氨酸酶的活性物进行了跟踪分离。采用制备高效液相色谱对活性物质进行了纯化精制,最后通过红外光谱、紫外光谱、核磁共振光谱和质谱等波谱分析,对分离得到的活性物进行了结构鉴定,确定该化合物为桑根酮C,其对酪氨酸酶的抑制率为96.23%,活性优于传统的酪氨酸酶抑制剂熊果苷。
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