人眼巩膜组织中Ⅰ型胶原蛋白表达与病理性近视的相关性研究

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背景:病理性近视(pathological myopia PM)又称恶性近视(malignant myopia)或高度近视(high myopia),是指屈光度高于- 6.0D的屈光不正,属近视的一种亚型;常伴发眼后极部的变性改变,包括巩膜变薄、脉络膜萎缩变薄及眼轴的增长。在所有屈光不正中,病理性近视危害最大,可伴有弱视、青光眼、白内障、玻璃体混浊、视网膜脱离等多种并发症,多导致视力不佳,甚至最终失明。高度近视占近视人群的27 %~33 %,近年来研究表明,病理性近视的发生发展与巩膜细胞外基质重塑有密切相关性,主要是胶原合成减少降解增加,最终导致巩膜变薄,眼轴不断延长眼球过度扩张。由于巩膜是近视发生时眼内所有调控机制的最终靶组织,而胶原占巩膜成分的绝大部分,其中大部分是I型胶原(collagen type I),其对维持眼球的基本形态阻止病理性近视的发展有重要作用。因此本实验以I型胶原蛋白作为研究对象,研究病理性近视巩膜组织细胞外基质中I型胶原蛋白表达量的改变和正常人眼前后极部巩膜组织细胞外基质中I型胶原蛋白表达量的差异。目的:分析病理性近视眼和非近视眼巩膜组织细胞外基质中I型胶原蛋白表达量的改变,以及正常人眼前后极部巩膜组织细胞外基质中I型胶原蛋白表达量的差异,探讨其与病理性近视的相关性,为病理性近视的病因学研究提供新的思路和方法,从而探讨通过干扰胶原的改变而防治病理性近视的方法。方法:1.1)收集15例行抗青光眼手术的原发性开角性青光眼(POAG)患者(伴有病理性近视)、15例行抗青光眼手术的POAG患者(不伴有病理性近视)术中切除的巩膜组织、15例自愿捐献角膜的健康正常人眼(不伴有病理性近视前极部巩膜),其中由行抗青光眼手术的POAG患者(伴有病理性近视)术中切除的巩膜组织作为病理性近视组,其余两组为非病理性近视组:角膜移植供眼组(简称角移组)和青光眼组。2)收集15例自愿捐献角膜的健康正常人眼巩膜组织分别取材于前极部及后极部进行比较。2.收集各组巩膜组织提取总蛋白,用Western blot的方法检测病理性近视组和角移组(前极部)和青光眼组的I型胶原蛋白,及角移组(后极部)的I型胶原蛋白,应用UVP凝胶成像系统进行照相,并测定个样本β-actin和I型胶原蛋白电泳条带灰度值,以β-actin电泳条带为参照,求出个样本I型胶原蛋白电泳条带灰度值和β-actin电泳条带灰度值比值。3.对所得数据采用单因素方差分析(One-Way ANOVA),配对设计的两样本均数检验(Paired-Sample T Test)等统计学方法应用SPSS11.5系统统计分析软件包进行处理。结果:在100KD处可见I型胶原的蛋白条带,在角移组(前极部)和青光眼组之间比较无显著性差异(P>0.01) ,而在病理性近视组明显低于角移组(前极部)和青光眼组,两组有极其显著性差异(P<0.001)。角移组(后极部)明显低于角移组(前极部),两组有极其显著性差异(P<0.001)。结论:病理性近视组与角移组(前极部)和青光眼组相比I型胶原蛋白表达量明显降低,并且角移组(后极部)明显低于角移组(前极部),可以初步认定正常人眼I型胶原蛋白在前后极部分布不一致,以及I型胶原蛋白与病理性近视发生有相关性。
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